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免疫金銀染色（immunogoldsilverstaining，IGSS）是在金免疫技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的更為敏感的技術(shù)，由Holgate在1983年首先建立成功。

一、原理

金免疫技術(shù)測定的產(chǎn)物上的金顆?？蓪y離子還原成銀顆粒，在金顆粒表面形成一色澤更深的黑色層，因而增強(qiáng)了金免疫技術(shù)的敏感性。

二、方法

IGSS的主要試劑為銀染液。以往一般用硝酸銀染液，但其對光的穩(wěn)定性較差；改用乙酸銀溶液后穩(wěn)定性加強(qiáng)，配方如下：

A液：0.22％乙酸銀溶液（乙酸銀110mg溶于去離子水50ml中）醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

B液：50％阿拉伯樹膠溶液（阿拉伯樹膠50g溶于去離子水100ml中，每天振搖3次，5天后過濾使用）。

C液：1％對苯二酚溶液（對苯二酚500mg溶于0.55mol/LpH3.8的檸檬酸鹽緩沖液50ml中）。

D液：在C液中加入B液10～40ml.

使用前將A液和D液等量混合，即為銀染液。

IGSS多用于組織化學(xué)檢測。對于以膜為載體的免疫學(xué)試驗(yàn)，金染色后的銀加強(qiáng)可按下法進(jìn)行：將膜用0.05mol/LpH8.2TBS浸洗3次，每次3min，用去離子水沖洗一次，浸入0.05mol/LpH3.8檸檬酸緩沖液平衡5min，浸入銀染液中，37℃25min。將膜取出，用去離子水沖洗，放入定影液1min，去離子水沖洗，空氣干燥。

三、應(yīng)用

金免疫技術(shù)的敏感度低于其它標(biāo)記免疫技術(shù)，經(jīng)銀加強(qiáng)染色后敏感度可與熒光免疫技術(shù)和酶免疫技術(shù)相當(dāng)。因此近年來發(fā)展了不少IGSS方法以替代熒光免疫技術(shù)，可以在普通顯微鏡下進(jìn)行檢測。

在以膜為載體的免疫技術(shù)（如免疫印跡法）中，也有應(yīng)用IGSS以替代酶免疫法。也有用金標(biāo)記抗體代替酶標(biāo)記抗體進(jìn)行類似ELISA的測定，最后進(jìn)行銀加強(qiáng)，其敏感度與ELISA相仿。