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免疫金標記技術主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性,在金標蛋白結合處,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒,當這些標志物在相應的配體處大量聚集時,肉眼可見紅色或粉紅色斑點,因而用于定性或半定量的快速免疫檢測。這一反應也可以通過銀顆粒的沉積被放大,稱之為免疫金銀染色(IGSS)。
一、膠體金的制備
(一)制備原理
膠體金的制備一般采用還原法,常用的還原劑有枸櫞酸鈉、鞣酸、維生素C、白磷、硼氫化鈉等。向一定濃度的金溶液內(nèi)加入一定量的還原劑使金離子還原成金原子,形成金顆粒懸液,也稱金溶膠。
(二)技術要點
枸櫞酸三鈉還原法制備金溶膠,如此制備的金溶膠其可見光區(qū)最高吸收峰在535nm.金溶膠的光散射性與溶膠顆粒的大小密切相關,一旦顆粒大小發(fā)生變化,光散射也隨之發(fā)生變異,產(chǎn)生肉眼可見的顯著的顏色變化,這就是金溶膠用于免疫沉淀或免疫凝集試驗的基礎。
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