凝膠層析時為什么較快通過凝膠柱的是大的溶質(zhì)分子?
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凝膠層析又稱分子篩過濾、排阻層析等。它的突出優(yōu)點是層析所用的凝膠屬于惰性載體,不帶電荷,吸附力弱,操作條件比較溫和,可在相當廣的溫度范圍下進行,不需要有機溶劑,并且對分離成分理化性質(zhì)的保持有獨到之處。對于高分子物質(zhì)有很好的分離效果。
不同類型凝膠的篩孔的大小不同。如[醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)原創(chuàng)]果將這樣的凝膠裝入一個足夠長的柱子中,作成一個凝膠柱。當含有大小不同的蛋白質(zhì)樣品加到凝膠柱上時,比凝膠珠平均孔徑小的蛋白質(zhì)就要連續(xù)不斷地穿入珠子的內(nèi)部,這樣的小分子不但其運動路程長,而且受到來自凝膠珠內(nèi)部的阻力也很大,所以越小的蛋白質(zhì),把它們從柱子上洗脫下來所花費的時間越長。凝膠中只有很少的孔徑可接受大的蛋白。因此,大的蛋白質(zhì)直接通過凝膠珠之間的縫隙首先被洗脫下來。
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