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色譜法

有關(guān)藥物檢驗(yàn)工考試,以下是“色譜法”,請(qǐng)考生查看!

色譜法(又稱層析法)根據(jù)其分離原理可分為:吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜與排阻色譜等。吸附色譜法是利用被分離物質(zhì)在吸附劑上被吸附能力的不同,用溶劑或氣體洗脫使組分分離;常用的吸附劑有氧化鋁、硅膠、聚酰胺等有吸附活性的物質(zhì)。分配色譜是利用被分離物質(zhì)在兩相中分配系數(shù)的不同使組分分離;其中一相被涂布或鍵合在固體載體上,稱為固定相,另一相為液體或氣體,稱為流動(dòng)相。常用的載體有硅膠、硅藻土、硅鎂型吸附劑與纖維素粉等。離子交換色譜是利用被分離物質(zhì)在離子交換樹脂上交換能力的不同使組分分離;常用的有不同強(qiáng)度的陽(yáng)、陰離子交換樹脂,流動(dòng)相為水或含有機(jī)溶劑的緩沖液。分子排阻色譜法又稱凝膠色譜法,是利用被分離物質(zhì)分子量大小的不同導(dǎo)致在填料上滲透程度不同使組分分離;常用的填料有分子篩、葡聚糖凝膠、微孔聚合物、微孔硅膠或玻璃珠等,根據(jù)固定相和供試品的性質(zhì)選用水或有機(jī)溶劑作為流動(dòng)相。

色譜法又可根據(jù)分離方法分為:紙色譜法、薄層色譜法、柱色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。所用溶劑應(yīng)與供試品不起化學(xué)反應(yīng),純度要求較高。分析時(shí)的溫度,除氣相色譜法或另有規(guī)定外,系指在室溫操作。分離后各成分的檢出,應(yīng)采用各品種項(xiàng)下所規(guī)定的方法。采用紙色譜法、薄層色譜法或柱色譜法分離有色物質(zhì)時(shí),可根據(jù)其色帶進(jìn)行區(qū)分,分離無(wú)色物質(zhì)時(shí),可在短波(254nm)或長(zhǎng)波(365nm)紫外光燈下檢視,其中紙色譜或薄層色譜也可噴以顯色劑使之顯色,或在薄層色譜中用加有熒光物質(zhì)的薄層硅膠,采用熒光猝滅法檢視;柱色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法可用接于色譜柱出口處的各種檢測(cè)器檢測(cè);柱色譜法還可分部收集流出液后用適宜方法測(cè)定。

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