公衛(wèi)執(zhí)業(yè)醫(yī)師實踐技能第三站：公共衛(wèi)生基本操作技能知識點

公共場所樣品采集方法及處理

一、理發(fā)用具微生物檢測樣品采集及處理（一）大腸菌群測定采樣應(yīng)在無菌操作下進行。將蘸有無菌生理鹽水的無菌棉拭子在推子前部上下均勻各涂抹3次，或在使用的刀、剪刀的兩側(cè)各涂抹1次采樣醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理。將采樣后的棉拭子剪去手接觸部位，放入10ml滅菌生理鹽水中，充分振搖，取5ml放入雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管中，置36℃±1℃溫箱培養(yǎng)24小時。

（二）金黃色葡萄球菌測定采樣方法同理發(fā)用具微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法中大腸菌群檢測的采樣，可將大腸菌群檢測后剩余的5ml待檢樣品進行金黃色葡萄球菌測定。

二、拖鞋微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法（一）霉菌和酵母菌測定1.將無菌棉試子蘸取無菌生理鹽水，在每只拖鞋鞋面與腳趾接觸處5cm×5cm面積上，有順序地均勻涂抹3次（1雙拖鞋為1份樣品）后，用滅菌剪刀將棉拭子手執(zhí)部分剪斷，將棉拭子放人l0ml裝有玻璃珠的無菌鹽水管中。

2.將盛有棉拭子的鹽水管在手心用力振蕩100次，再用帶橡皮乳頭的1ml滅菌吸管反復(fù)吹吸50次，使霉菌孢子充分散開。此液為1∶10稀釋液。

3.用滅菌吸管吸取l∶l0檢液2ml，分別注入到2個滅菌平皿內(nèi)，每皿1ml.另取lml注入9ml加有玻璃珠的滅菌鹽水管中，換1支lml滅菌吸管吹吸5次，此液為l∶100稀釋液。

4.按上述操作順序作10倍遞增稀釋液，每稀釋1次，換一支1ml滅菌吸管，根據(jù)樣品的污染情況，選擇3個合適的稀釋度。

5.將溶化并冷卻至45℃左右的培養(yǎng)基注入滅菌的平皿中，待瓊脂凝固后，倒置于25℃～28℃溫箱中，3天后開始觀察，共培養(yǎng)觀察1周。