醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技士：《答疑周刊》2016年第25期：

【臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)】

胞體直徑12～20μm，圓形或橢圓形，胞核大，位于中央或偏位，核染色質(zhì)開始聚集，核仁可見或消失。胞質(zhì)量較多，呈淡藍(lán)、藍(lán)或深藍(lán)色，漿內(nèi)含紫紅色非特異性的天青胺藍(lán)顆粒。POX染色陽性。這是

A.早幼粒細(xì)胞

B.原粒細(xì)胞

C.中幼粒細(xì)胞

D.幼單細(xì)胞

E.幼淋細(xì)胞

【正確答案】A

POX染色中文稱過氧化物酶染色：一種鑒別急性白血病類型的實(shí)驗(yàn)室檢查。

原理

粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的胞漿內(nèi)的髓過氧化物酶分解過氧化氫，釋放新生態(tài)氧，使無色聯(lián)苯胺氧化成藍(lán)色聯(lián)苯胺，后者進(jìn)一步變成棕色化合物沉著于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。

油鏡鏡檢。結(jié)果

細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有藍(lán)黑色顆粒者為陽性。

（-）無顆粒沉著；

（±）顆粒細(xì)小，分布稀疏；

（+）顆粒較粗，局灶分布；

（++）顆粒粗大，分布較密，占胞質(zhì)1/2～2/3；

（+++）顆粒粗大，呈團(tuán)塊分布；

（++++）全部胞質(zhì)均部滿顆粒，可覆胞核。

臨床意義

POX主要分布在粒細(xì)胞和單核細(xì)胞內(nèi)，隨著粒細(xì)胞成熟的程度而逐漸增強(qiáng)，中性分葉核粒細(xì)胞為強(qiáng)陽性。嗜酸性粒細(xì)胞陽性程度最強(qiáng)，其陽性顆粒比中性粒細(xì)胞粗大，有折光。堿性粒細(xì)胞為陰性。急性粒細(xì)胞性白血病時(shí)呈陽性反應(yīng)，急性單核細(xì)胞性白血病時(shí)則多呈弱陽性反應(yīng)，急性淋巴細(xì)胞性白血病時(shí)呈陰性反應(yīng)。

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【臨床血液學(xué)檢驗(yàn)】

有關(guān)遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥的確診實(shí)驗(yàn)為

A.酸化甘油溶血試驗(yàn)

B.紅細(xì)胞鐮變?cè)囼?yàn)

C.高滲冷溶血試驗(yàn)

D.滲透脆性試驗(yàn)

E.血紅蛋白電泳

【正確答案】C

學(xué)員提問：為什么？

解析：您好，學(xué)員記憶混淆了，陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥（PNH）是酸化血清溶血試驗(yàn)

遺傳性球形細(xì)胞增多癥：①血象：紅細(xì)胞呈球形，直徑小于6μm，大小一致，數(shù)量占10%～70%，硬度增加，中心淡染區(qū)消失，簡易紅細(xì)胞滾動(dòng)試驗(yàn)呈陽性。②骨髓象：骨髓紅細(xì)胞系統(tǒng)增生活躍。③特殊試驗(yàn)：脆性試驗(yàn)：紅細(xì)胞常于0.68%NaCl開始溶解，0.4%NaCl完全溶解，鹽水滲透脆性增加，孵育后脆性更高，ATP或葡萄糖能夠糾正篩選試驗(yàn)，紅細(xì)胞壽命期縮短。自溶試驗(yàn)：溶血大于5%，加ATP可減輕溶血。遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥的確診試驗(yàn)為高滲冷溶血試驗(yàn)和膜蛋白電泳分析。

陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥（PNH）：①血象：貧血為大細(xì)胞正色素性或低色素性，網(wǎng)織紅細(xì)胞增高，少數(shù)病例減少。紅細(xì)胞按對(duì)補(bǔ)體敏感性分為接近正常紅細(xì)胞（Ⅰ型）、中等敏感（Ⅱ型）、高度敏感（Ⅲ型）。溶血程度取決于Ⅲ型紅細(xì)胞多少。白細(xì)胞計(jì)數(shù)半數(shù)病例減少，中性粒細(xì)胞減少，淋巴細(xì)胞增多，血小板多數(shù)低于正常。②骨髓象：骨髓象隨病情變化不一，除按有核細(xì)胞分四級(jí)外，注意粒紅比例，增生低下者應(yīng)注明部位，診斷疑難者需同時(shí)作病理活檢。③溶血試驗(yàn)：酸化血清溶血試驗(yàn)（Hamtest）、蔗糖溶血試驗(yàn)、蛇毒溶血試驗(yàn)、尿潛血（尿含鐵血黃素）試驗(yàn)等，其中兩頊陽性或一項(xiàng)陽性，但對(duì)照陰性，結(jié)果才可靠；排除其他需鑒別的溶血性疾病。因此答案為C。

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【問題】Coombs試驗(yàn)的配血原理是什么？

凡Coombs試驗(yàn)即抗人球蛋白試驗(yàn)，是檢測血液中溫反應(yīng)性抗體的一種方法，也是診斷自身免疫性溶血性貧血的重要指標(biāo)。溫抗體中50%以上由IgG介導(dǎo)，其次為IgM，IgA和C3d等，因此本試驗(yàn)應(yīng)分選各種單克隆抗體同時(shí)測定。Coombs試驗(yàn)分為直接試驗(yàn)（直接反應(yīng)）和間接試驗(yàn)（間接反應(yīng)）：直接試驗(yàn)的目的是檢查紅細(xì)胞表面的不完全抗體；間接試驗(yàn)的目的是檢查血清中存在游離的不完全抗體。

（1）直接coombs試驗(yàn)用于檢測已粘附在紅細(xì)胞表面的不完全抗體。即將受檢紅細(xì)胞充分洗滌后，將抗球蛋白試劑加入已結(jié)合有抗體的受檢紅細(xì)胞懸液中，即可見細(xì)胞凝集?？捎貌Ｆㄗ龆ㄐ栽囼?yàn)，也可用試管法或微量法做半定量測定。用于檢測新生兒溶血癥、自身免疫性貧血和醫(yī)源性溶血性疾病等。

（2）間接coombs試驗(yàn)用于檢測游離在血清中的不完全抗體。即將待測血清標(biāo)本加入具有特異抗原的紅細(xì)胞懸液中，如果抗原抗體相應(yīng)則發(fā)生結(jié)合，再加入抗球蛋白抗體，則出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集。本法多用于檢測母體Rh（D）抗體以及因紅細(xì)胞不相容的輸血而產(chǎn)生的血型抗體。此外也可用專一特異性的抗球蛋白血清，如抗IgG、抗IgM、抗IgA、抗補(bǔ)體血清等，分析與紅細(xì)胞表面結(jié)合的不完全抗體的Ig亞類。

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