[ 執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試教學(xué)大綱 ]

　　一、細胞的形態(tài)與大小

　　 (一)細胞的形態(tài) (二)細胞的大小

　　二、細胞的構(gòu)造與功能

　　(一)細胞膜 (二)細胞質(zhì) (三)細胞核

　　三、細胞周期

　?。ㄒ唬〨1期 （二）S期 （三）G2期 （四）M期

　　四、細胞分裂

　?。ㄒ唬o絲分裂 （二）有絲分裂

　　五、細胞分化

　　六、細胞衰老與死亡

　　[ 文本教案 ]

　　目的要求

　　1． 要求學(xué)生掌握細胞的形態(tài)和大小

　　2． 掌握細胞膜的“液態(tài)鑲嵌模型”的結(jié)構(gòu)及功能

　　3． 掌握細胞器的結(jié)構(gòu)和功能

　　重 點

　　液態(tài)鑲嵌模型，各種細胞器的結(jié)構(gòu)和功能

　　難 點

　　1． 細胞膜的分子結(jié)構(gòu)，即液態(tài)鑲嵌模型或脂質(zhì)球蛋白鑲嵌模型

　　2． 細胞膜的功能中的擴散作用、主動運輸、胞吞作用和胞吐作用

　　課堂組織

　　一．提問

　　1． 組織學(xué)、胚胎學(xué)、細胞、組織的概念

　　2． 組織胚胎學(xué)的研究方法

　　二．結(jié)合Powerpoint幻燈片扼要復(fù)習(xí)上次課內(nèi)容并加以總結(jié)醫(yī)學(xué)，教育|網(wǎng) 搜集整理

　　三．講新課

　　1． 采用Powerpoint幻燈電化教學(xué)，實驗課前看電視教學(xué)片

　　2． 本章共計6學(xué)時，講授4學(xué)時，實驗2學(xué)時

　　3． 實驗課在顯微鏡室上，詳見實驗與繪圖指導(dǎo)，即另一本教案（實驗課用）

　　授課提綱

　　一．細胞的形態(tài)與大小

　　二．細胞的構(gòu)造與功能

　　（一）細胞膜的結(jié)構(gòu)

　　1． 化學(xué)成分：蛋白質(zhì)、酶、脂類、多糖、水、無機離子、微量核酸

　　2． 分子結(jié)構(gòu)：EM下，分出平行三層，內(nèi)外二層電子致密度高，為磷脂分子，中間層為鑲嵌的球蛋白，構(gòu)成單位膜

　?。?）脂質(zhì)雙分子層

　　（2）球蛋白

　?。?）細胞膜上的糖類（細胞衣、糖衣）

　?。ǘ┘毎さ墓δ?

　　1． 物質(zhì)運輸

　　（1）擴散作用

　?。?）主動運輸

　　（3）胞吞與胞吐

　　2． 構(gòu)成受體

　　3． 細胞膜抗原

　　4． 保護作用、運動、吸收、分泌、分化

　?。ㄈ┘毎|(zhì)的構(gòu)造和功能

　　1． 基質(zhì)（溶質(zhì)、內(nèi)含物）：是存在于細胞質(zhì)內(nèi)的營養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物。

　　細胞骨架、支架作用，維持細胞形狀

　　2． 細胞器

　　（1）線粒體Mitochondria 雙層單位膜構(gòu)成的顆粒狀或短棒狀結(jié)構(gòu)。

　　功能：進行生物氧化、提供能量

　?。?）核糖體（核蛋白體）（Ribsome）由大小2個亞基構(gòu)成，分游離核糖體、聚核糖體。功能：合成蛋白質(zhì)

　?。?）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Endoplasmic reticulum

　?、?粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)RER：單位膜構(gòu)成，有核糖體

　　功能：參與蛋白質(zhì)合成與運輸

　　② 滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)SER：單位膜構(gòu)成，無核糖體

　　功能：根據(jù)細胞類型定，參與糖元、脂肪、固醇、激素合成

　?。?）高爾基復(fù)合體Golgi complex， 由扁平囊泡、大泡、小泡構(gòu)成

　　功能：形成分泌顆粒，合成多糖與脂蛋白

　?。?）溶酶體Lysosome 單位膜包有水解酶

　　功能：消除作用，精子頂體也是溶酶體

　?。?）過氧化物酶體Peroxisome單位膜包氧化酶，過氧化氫酶

　　功能：氧化，產(chǎn)生過氧化氫

　　（7）中心體Centrosome,2個中心粒外包致密物質(zhì)，參與細胞分裂

　?。?）微絲Microfilament 肌動蛋白構(gòu)成，MF中起收縮作用，NC、上皮細胞起支持作用

　　微管Microtubule 微管蛋白構(gòu)成，纖毛、鞭毛、紡錘體中運動，NC中支持與運輸

　　教學(xué)法

　　多媒體教學(xué)

　　課目 細胞學(xué)（續(xù)第二次課）Cytology

　　目的要求

　　1． 掌握細胞核的結(jié)構(gòu)和機能

　　2． 掌握細胞周期

　　3． 掌握細胞的有絲分裂與無絲分裂

　　4． 了解細胞的分化、衰老和死亡

　　重點

　　細胞核的結(jié)構(gòu)、染色質(zhì)、染色體、細胞周期、細胞分裂

　　難點

　　1． 染色質(zhì)（常染色質(zhì)、異染色質(zhì)）

　　2． 染色體

　　3． 細胞繁殖周期

　　課堂組織

　　一．提問

　　1． 脂質(zhì)球蛋白鑲嵌模型

　　2． 細胞膜的功能

　　3． 各種細胞器的結(jié)構(gòu)及功能

　　4． 溶酶體的形成與退化過程

　　二．結(jié)合Powerpoint幻燈片扼要復(fù)習(xí)細胞膜與細胞質(zhì)的內(nèi)容并加以歸納和總結(jié)

　　三．上新課

　　1． 采用Powerpoint幻燈片，多媒體教學(xué)

　　2． 講授2學(xué)時，實驗2學(xué)時

　　3． 實驗課在顯微鏡室上，具體內(nèi)容等詳見實驗、繪圖指導(dǎo)，即另一本教案

　　授課提綱

　?。ㄋ模┘毎薔ucleus

　　1． 核膜：薄層單位膜，外面附著蛋白質(zhì)，內(nèi)面光滑，膜上有核孔，便于物質(zhì)交換。

　　2． 核質(zhì)nucleoplasm ：無定型的膠狀物，含各種酶與無機鹽。

　　3． 核仁nucleolus：由核糖核酸和核蛋白構(gòu)成，網(wǎng)狀支架，可合成核蛋白。

　　4． 染色質(zhì)Chromatin：由蛋白質(zhì)核DNA組成，DNA是遺傳物質(zhì)。

　　常染色質(zhì)：是指間期核的染色質(zhì)上和分裂期的染色體上被堿性染料著色較淺的區(qū)域。

　　異染色質(zhì)：是間期核的染色質(zhì)上和分裂期的染色體上被堿性染料著色較深的區(qū)域，屬非活動性染色質(zhì)。

　　染色體Chromosome細胞進入有絲分裂期，染色質(zhì)高度卷曲和螺旋化，變粗變短，形成一定形態(tài)結(jié)構(gòu)和數(shù)量的染色體。

　　不同動物染色體的數(shù)目不同。哺乳動物有一對性染色體：♀-XX，♂-XY

　　應(yīng)用與于生產(chǎn)中，精子分離X-Y精子，X精子與卵結(jié)合產(chǎn)♀，奶牛產(chǎn)奶；Y精子與卵結(jié)合產(chǎn)♂，鹿茸，麝香等。

　　三．細胞周期Cell cycle

　　指細胞從前一次分裂結(jié)束時開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的一個完整的細胞世代。

　　（一）分裂間期

　　1． G1期，DNA合成前期

　　2． S期，DNA合成期

　　3． G2期，DNA合成后期

　?。ǘ┓至哑冢∕期）

　　形成2個子細胞，細胞周期結(jié)束

　　四．細胞分裂Cell division

　?。ㄒ唬┯薪z分裂Mitosis 又分四期：

　　1． 前期Prophase

　　2． 中期Metaphase

　　3． 后期Anaphase

　　4． 末期Telophase

　　（二）無絲分裂Amitosis（直接分裂）

　　五．細胞分化cell differentiation

　　是在發(fā)育進程中，細胞發(fā)生化學(xué)組成、形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能彼此互異逐步改變的現(xiàn)象。高等生物細胞分化很顯著，基本不可逆轉(zhuǎn)，受遺傳物質(zhì)的調(diào)控和環(huán)境影響。

　　六．細胞的衰老與死亡

　　教學(xué)法

　　多媒體教學(xué)

　　[ 教案 ]

　　[ 實驗指導(dǎo) ]

　　實驗32 顯微鏡的構(gòu)造和使用方法，組織切片的制做程序

　　一、目的要求

　?、耪莆诊@微鏡的基本結(jié)構(gòu)及使用方法。

　　(2)了解組織切片制做知識，有助于觀察切片。

　　二、觀察內(nèi)容

　　1．顯微鏡的一般構(gòu)造：分光學(xué)部分和機械部分：

　?、殴鈱W(xué)部分

　　目鏡?鶴霸誥低采隙?，冷熸讐涡謩傠，常用的?10×目鏡。

　　物鏡：裝在轉(zhuǎn)換器上，一般常用的物鏡為4×、10×、40×和100×（油浸鏡頭）。

　　集光器：包括聚光鏡和光圈（虹彩）兩部分。裝于載物臺下面。

　?、茩C械部分

　　鏡座：為顯微鏡基部，用以固定鏡身。

　　載物臺：為放置標本的平臺，其中有通光孔，兩旁有壓片和標本移動器。

　　鏡頭轉(zhuǎn)換器：位于鏡筒之下，可裝物鏡，為轉(zhuǎn)換不同倍數(shù)的物鏡用。

　　粗調(diào)節(jié)輪：旋轉(zhuǎn)時，載物臺升降距離較大。

　　微調(diào)節(jié)輪：旋轉(zhuǎn)一周，可使鏡頭升或降0.1毫米。

　　鏡臂：供握持顯微鏡用。

　　粗調(diào)限位器：撥下限位器使載物臺只能使粗調(diào)上升至所限位置，可避免因操作不慎而導(dǎo)致高倍鏡與標本相碰。

　　2．顯微鏡的使用方法

　　⑴低倍鏡使用法：

　?、賹⑶衅瑯吮局糜谳d物臺上，使切片內(nèi)的標本，對準鏡臺中央小孔，然后用壓片夾固定切片。

　　②將10×物鏡移至中央（位于光軸上），旋動粗調(diào)節(jié)輪使物鏡與載片相距1厘米左右。

　?、蹖⒎垂忡R（自帶光源的顯微鏡除外）對準光源，集光器調(diào)到適當(dāng)亮度。

　?、芤宰笱刍蛴已蹖誓跨R，進行觀察。旋動粗調(diào)節(jié)輪，使載物臺漸漸上升，至標本的影象現(xiàn)出為止，撥動粗調(diào)限位器限位。

　?、菪齽蛹氄{(diào)節(jié)輪，使載物臺上、下微微移動，直到顯出清晰的影象。

　?、聘弑剁R使用方法：

　?、僖狼胺ㄏ扔玫捅剁R將焦點調(diào)準，使物象清晰。

　?、趯⒂麢z標本的某一部分移至低倍鏡視野中央。

　?、壑苯诱{(diào)轉(zhuǎn)高倍物鏡，稍將細調(diào)節(jié)輪上下旋動，至顯出清晰的物象為止。

　?、怯顽R的使用方法：

　?、儆糜顽R前，先將集光器上升到頂，虹彩放大，使亮度達到最強度。

　　②將需要詳細觀察的部分，移到視野中心，用壓片夾固定，切勿移動。

　　③將高倍物鏡移開，滴加一滴香柏油于切片被檢部位。

　　④轉(zhuǎn)換油鏡頭，使鏡頭與被檢物間充滿香柏油，然后轉(zhuǎn)動細調(diào)節(jié)輪，直至有清晰的物象為止，此時切勿使用粗調(diào)節(jié)輪，以免壓碎切片，損壞鏡頭。

　　⑤用完油鏡后，必須將鏡頭和切片上的香柏油用擦鏡紙擦去，并用沾有乙醚——酒精液（7：3）的擦鏡紙擦拭鏡頭及載片，以免污損鏡頭。

　　3．使用顯微鏡注意事項

　　①移動顯微鏡時一手緊握鏡臂，一手平托鏡座，使鏡身保持直立狀態(tài)。

　?、诜补鈱W(xué)部分不可用手指或其它物品（如毛巾、紙張）擦拭，要用清潔的擦鏡紙，必要時加一滴乙醚——酒精液擦拭。

　?、鄄坏秒S意拆卸顯微鏡的任何組成部分。

　?、懿荒苡酶弑剁R檢視任何不加蓋片的標本，以免污染物鏡，顯微鏡任何部分不應(yīng)受潮。

　?、莸魮Q高倍物鏡或油浸鏡后，即不能用粗調(diào)節(jié)輪，只能用細調(diào)節(jié)輪，以免損壞載片及鏡頭。

　?、奘褂弥邪l(fā)生問題時，請隨時報告教師，切勿自行處理。

　　組織切片制作原理和程序：

　　1．取材：要取最新鮮的正常的材料。由于各器官組織壞死變化很快，所以取材要求迅速。取材時要用鋒利的刀片或剪刀，勿用鑷子對組織加以壓迫，以免組織破裂和變形。

　　2．固定：將取下的材料放在固定液中固定24小時，目的是防止腐敗、保持原有結(jié)構(gòu)并使組織硬化，便于處理，常用的固定液有10％福爾馬林，Bouin液及Zenker液。

　　3．脫水及透明：材料固定后，要經(jīng)過脫水和透明處理，才能包埋。脫水是除去組織中的水分，透明是一種能使石蠟、火棉膠溶解的溶劑，使組織透明，并使石蠟或火棉膠逐漸導(dǎo)入組織內(nèi)。

　　4．包埋：材料脫水透明后，即可包埋，包埋可使材料有適當(dāng)?shù)挠捕缺阌谇谐杀∑?，包埋常用石蠟和火棉膠，其中石蠟最常用，需時短，且可制成較薄的切片。

　　火棉膠則用于神經(jīng)組織、眼球等大塊或宜于收縮的材料。

　　5．切片及貼片：切片法有徒手切片、冰凍切片、石蠟切片和火棉膠切片。

　　石臘切片用于輪轉(zhuǎn)式切片機或滑走切片機操作?；鹈弈z用于滑走切片機操作。

　　石蠟切片用蛋白甘油混合液貼附于玻片上，火棉膠切片，則可直接染色，染色后，封藏于玻片上。

　　6．染色：染色的目的式使細胞中的構(gòu)造清楚，易于觀察。染料的種類繁多，其性質(zhì)也不同，有酸性、中性、堿性。染色方法有單一法、雙重法、三重法。其中雙重法以蘇木素——伊紅染色法最常用。

　　7．封藏：染色后的切片，用中性樹膠或合成樹膠加蓋玻片封藏。

　　實驗33 細胞的基本結(jié)構(gòu)

　　一、目的要求：通過觀察要求掌握細胞的基本結(jié)構(gòu)。

　　二、準備工作：復(fù)習(xí)講課內(nèi)容和預(yù)習(xí)實驗指導(dǎo)。

　　三、觀察內(nèi)容

　　1．卵細胞：1號切片

　　卵細胞是動物體內(nèi)的大型細胞，觀察其形態(tài)結(jié)構(gòu)較為方便。

　　貓、豬或羊的卵巢切片，Bouin氏液固定，石蠟包埋，HE染色。

　　先用低倍鏡觀察，在靠近卵巢周邊處，可見到成群存在（貓）或散在分布（豬、羊）的大型圓形卵細胞，在卵細胞周圍還有一層扁平的細胞圍繞，共同組成初級卵泡，此時的卵細胞系初級卵母細胞，外周的扁平細胞叫卵泡細胞。

　　選擇一個結(jié)構(gòu)清楚的初級卵泡移到視野中央，轉(zhuǎn)換成高倍鏡觀察，重點觀察卵細胞。

　　細胞膜 位于細胞的表面，在固定染色的切片上為一薄膜。

　　細胞質(zhì) 在本切片中，只能看到細胞質(zhì)內(nèi)有紅染的小顆粒（卵黃顆粒），其它的細胞器和內(nèi)含物在制片過程中或被溶劑溶解或未染出。

　　細胞核 呈圓形，位于細胞的中央或稍偏的位置，染成藍紫色，核膜明顯，染色質(zhì)呈深染的團塊或顆粒狀，有1-2個核仁。

　　高倍鏡下繪圖：示卵細胞構(gòu)造。

　　注解：細胞膜、細胞質(zhì)、卵黃顆粒、細胞核、核膜與核仁。

　　2．神經(jīng)細胞：40號切片，4號切片

　　低倍鏡下，可見到一些大型帶突起的藍染細胞——脊髓腹角運動神經(jīng)細胞。這種神經(jīng)細胞有很多突起，但由于切片關(guān)系，只能看到其中的數(shù)個突起。胞質(zhì)內(nèi)有染色呈深藍紫色的塊狀或顆粒狀物質(zhì)，稱尼氏體，在電鏡下為粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。胞核著色較淡，多位于細胞中央，內(nèi)含少量染色質(zhì)，核膜明顯，有一個大而圓的核仁。

　　高倍鏡下繪圖：示神經(jīng)細胞的構(gòu)造。

　　注解：胞體、胞突、胞核、尼氏體、核仁。

　　3．肝細胞：68號切片

　　豬肝，Bouin氏液固定，石蠟切片，HE染色.

　　低倍鏡下找到呈多邊形的肝小葉，選擇一個肝小葉換高倍鏡觀察，可見到呈索狀排列的肝細胞，呈多邊形，有1-2個圓形細胞核，核仁明顯，核膜清楚，核內(nèi)染色質(zhì)稀疏，染色較淺

　　觀察細胞器與內(nèi)含物

　　細胞器與內(nèi)含物的種類很多，實驗課僅觀察幾種主要的細胞器和內(nèi)含物在光鏡下的形態(tài)和位置。各種細胞器和內(nèi)含物，在一般的HE染色的切片上看不到，須用特殊方法染色顯示。

　　線粒體——示教：3號片

　　小狗胰臟，Regaud氏液固定，石蠟切片，鐵蘇木素染色。

　　線粒體用鐵蘇木素染色呈黑色，分布于核周圍的細胞質(zhì)中，線粒體在高倍鏡下呈粒狀、線狀或短棒狀，或直或曲，輪廓鮮明。

　　胰臟的分泌細胞呈錐形，核大而圓，位于細胞中央，細胞游離端聚集有許多大而圓的黑色顆粒為分泌顆粒。

　　高爾基復(fù)合體——示教：2號片

　　狗或豬的脊神經(jīng)節(jié)，Golgi氏亞砷酸硝酸銀法鍍?nèi)尽?

　　在切片上有大小不一的圓形脊神經(jīng)節(jié)細胞，胞核不著色，但能看到淡黃色的核仁。核周圍的細胞質(zhì)中有鍍?nèi)境珊谏木W(wǎng)狀或顆粒狀物，即光鏡下的高爾基復(fù)合體。

　　糖元——示教：6號片

　　豬肝，冷Carnoy氏液固定，PAS反應(yīng)法顯示糖元，蘇木素復(fù)染胞核。

　　在高倍鏡下，肝細胞中可見到大量紫紅色的糖元顆?；蛐K，在很多肝細胞中，糖元偏于細胞一側(cè)，此系制片過程造成，生活狀態(tài)時分布較均勻。