摘 要:目的觀察呼吸道合胞病毒(RSV)對致敏小鼠氣道炎癥和CD8+T細胞功能的影響。
方法 BALB/c小鼠40只,隨機分成4組,分別為磷酸鹽緩沖液(PBS)對照組、雞卵白蛋白(OVA)組、RSV組、OVA/RSV組;應用OVA腹腔注射致敏、OVA氣道霧化結合RSV滴鼻激發(fā)哮喘;支氣管肺泡灌洗液(BALF)作細胞分類計數(shù);酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定BALF上清中白細胞介素(IL)-4、IL-5、干擾素(IFN)-γ含量;蘇木精-依紅(HE)染色觀察肺病理變化;采用三色光流式細胞分析法測定氣管旁淋巴結(PBLN)中CD4+、CD8+T細胞及細胞內(nèi)細胞因子IFN-γ、IL-4、IL-5表達與TH2/TH1、Tc2/Tc1比值變化。
結果(1)BALF中細胞總數(shù)及分類:與OVA組比較,OVA/RSV組細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞、淋巴細胞均明顯增加(分別P<0.01);與RSV組比較,OVA/RSV組細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞明顯增加(分別P<0.01)。(2)BALF上清中細胞因子含量:與OVA組比較,OVA/RSV組IFN-γ、IL-4、IL-5含量均明顯升高(分別P<0.01);與RSV組比較,OVA/RSV組IFN-γ無明顯變化,而IL-4、IL-5顯著上升(分別P<0.01)。(3)肺組織病理:OVA/RSV組與其他各組比較氣道黏膜增厚,管腔狹窄、收縮,上皮破壞,管壁周 醫(yī)學教 育網(wǎng) 搜 集 整理圍炎癥細胞浸潤明顯加重。(4)PBLN中CD4+(WN-γ+、IL-4+、IL-5+)、CD8+(IFN-γ+、IL-4+、IL-5+)T細胞各占CD3+T細胞百分比及TH2/TH1、Tc2/Tc1比值變化:與OVA組比較,OVA/RSV組CD8+(IFN-γ+、IL-4+、IL-05+)T細胞百分比、Tc2/Tc1比值增加(分別P<0.01),TH2/TH1比值無明顯變化。與RSV組比較,OVA/RSV組CD4+(IL-4+、IL-5+)T細胞、TH2/TH1比值、CD8+(IL-4+、IL-5+)T細胞、Tc2/Tc1比值均明顯上升(分別P<0.01)。
結論(1)OVA致敏小鼠RSV感染后可明顯加重氣道炎癥,TH2、TH1型炎癥均加強,且以TH2型炎癥加重為主。(2)OVA致敏小鼠RSV感染后可引起CD8+T細胞數(shù)量及功能改變,即由產(chǎn)生IFN-γ+為特征的Tc1細胞向產(chǎn)生IL-4+、IL-5+為特征Tc2細胞轉(zhuǎn)化,并可能與氣道內(nèi)IL-4、IL-5升高及嗜酸性粒細胞的大量募集有關。