摘 要：目的構(gòu)建含有HIV-1核心蛋白gag基因的真核表達(dá)質(zhì)粒，并研究其免疫應(yīng)答反應(yīng)。

　　方法 采用PCR方法從1例HIV感染者中擴(kuò)增出gag基因，構(gòu)建重組質(zhì)粒pcDNA-GAG。接種小鼠后，檢測(cè)其抗體及抗體亞類，并對(duì)小鼠的淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行分析，采用3H-TdR法、ELISPOT方法和51Cr釋放法分別檢測(cè)T淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)性、特異性分泌IFN-γ的CD8+T淋巴細(xì)胞以及特異性CTL殺傷活性。

　　結(jié)果 重組質(zhì)粒體外表達(dá)目的蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量（Mr）約為55×10³。免疫小鼠后可誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性抗體，其中IgG2a與IgG的比例顯著高于IgG1與IgG的比例；T淋巴細(xì)胞體外經(jīng)ConA刺激后SI達(dá)到160.67，顯著高于對(duì)照組（14.04，P＜0.05）；產(chǎn)生IFN-γ的CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)目以及特異殺傷率均顯著高于對(duì)照組小鼠（P＜0.05）。

　　結(jié)論 重組質(zhì)粒pcDNA-GAG可誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生特異性體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng)，而且ELISPOT方法檢測(cè)特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng)的結(jié)果與51Cr釋放法一致，提示可用此法對(duì)DNA疫苗誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫進(jìn)行評(píng)價(jià)。