摘 要：目的 改進(jìn)流式細(xì)胞儀三色法檢測外周血Th細(xì)胞亞群的刺激培養(yǎng)方案。

　　方法 外周全血經(jīng)RPMI1640培養(yǎng)液和終濃度為25μg/L的PMA、1 mg/L的Ionomycin、20μg/的Monensin培養(yǎng)2 h后，用流式細(xì)胞儀分別檢測CD4、CD69陽性細(xì)胞及CD3陽性細(xì)胞表達(dá)IFN-γ和IL-4的比例.同時檢測培養(yǎng)前CD4陽性細(xì)胞及培養(yǎng)4 h后CD3陽性細(xì)胞表達(dá)IFN-γ和IL-4的比例。

　　結(jié)果 淋巴細(xì)胞門中CD⁴⁺細(xì)胞與CD^4-細(xì)胞能明顯區(qū)分，培養(yǎng)前與培養(yǎng)2 h后CD⁴⁺細(xì)胞比例差異無顯著性（P＞0.05）；T淋巴細(xì)胞中90%以上表達(dá)CD69；刺激培養(yǎng)2 h和4 h后CD³⁺細(xì)胞表達(dá)IFN-γ和IL-4的比例差異無顯著性（P＞0.05）。

　　結(jié)論 該實驗確定的培養(yǎng)方案能滿足流式細(xì)胞術(shù)CD4、IFN-γ、IL-4三色法檢測Th細(xì)胞亞群的培養(yǎng)要求。