HLA血清學定型試是臨床醫(yī)學檢驗技士/技師/主管技師考試復習需要了解的檢驗基礎知識，醫(yī)學|教育網搜集整理了相關內容與考生分享，希望給予大家?guī)椭?

HLA-A、B、C、DR或DQ位點的抗原可用血清方法進行檢測，所以稱為SD抗原（serologicallydefinedantigen），其檢測方法目前普遍采用補體依賴的細胞毒（complementdependentcytotoxicyty，CDC）試驗。

1.試驗方法美國國家衛(wèi)生研究院（NIH）的標準方法如下：將一系列已知特異性的標準分型血清（1μl/孔）按設計好的方案加到72孔或60孔專用反應板中（如暫時不用可以冰凍保存）；加入待檢淋巴細胞2000個/1μl/孔，置室溫30min讓抗體與抗原結合；加入補體（多為家兔混合血清）5μl，置室溫60min；每孔加入5%伊紅2～3μl，使死細胞著色；3～5min后每孔加12%福爾馬林8μl固定細胞；待細胞全部沉淀后用相差顯微鏡或倒置顯微鏡觀察結果。某孔的著色細胞超過50個即為陽性反應，說明被檢細胞的HLA型與該孔所加抗體的相一致；否則為不一致。

2.細胞分離檢測活體可取外周血直接分離；檢測尸體時取淋巴結，制成單個細胞并洗滌后再分離。檢測HLAⅠ類抗原時取單個核細胞層的細胞即可應用，因為該層細胞都表達Ⅰ類抗原；但檢測HLA-DR和DQ等Ⅱ類抗原時，就需要進一步分離較純的B細胞（純度達80%以上），因為Ⅱ類抗原不分布在T細胞上。

3.分型血清試驗用的標準抗血清必須從經產婦（尤其多產婦）的血清中篩選，胎盤液或其他體液也可應用；也可通過人工免疫獻血員的方法得到。篩選的方法也用CDC試驗，只是將已知與待檢互換醫(yī)學|教育網搜集整理。Ⅱ類抗血清篩選后還必須用混合血小板將其中可能含有的Ⅰ類抗體吸收去，因試驗用的B細胞上也有Ⅰ類抗原。許多人嘗試過抗HLA的單克隆抗體，但是多不成功，因鼠源性抗體主要是針對人類的公共抗原而非某個體的HLA私有抗原；還有一個原因是鼠源性抗體多不能固定補體，不能用細胞毒方法進行檢測。

4.HLA定型板某些專門實驗室將HLA定型血清預先加到專用的反應板上冰凍保存，可供自己或出售給他人使用，試驗時只須加入待檢細胞及其它試劑即可。定型板中抗血清的種類要覆蓋本民族或本地區(qū)80%以上的抗原，其中高頻抗原每種抗血清3份以上，低頻抗原每種抗血清2份以上。定型血清板須經幾個實驗室認可或有關部門核準后才能銷售和使用；現(xiàn)在國內所做的定型板多限于HLAⅠ類抗原的檢測。