為方便廣大考生復(fù)習(xí)，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理了臨床醫(yī)學(xué)檢驗技士考試關(guān)于T細胞功能測定的相關(guān)內(nèi)容，以供參考。

1.淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗

T細胞在體外受特異性抗原（舊結(jié)核菌素等）或有絲分裂原（pHA、ConA等）刺激后，能轉(zhuǎn)化為淋巴母細胞。試驗時取外周血或分離的淋巴細胞，加入有絲分裂原或特異性抗原，在培養(yǎng)液中培養(yǎng)72小時，經(jīng)涂片染色后鏡檢計算轉(zhuǎn)化百分率。正常人為70％左右，轉(zhuǎn)化率低表明細胞免疫功能下降。若在培養(yǎng)終止前6小時加入3H-TdR，經(jīng)β液體閃爍儀檢測淋巴細胞內(nèi)3H-TdR的摻入量，亦可算出轉(zhuǎn)化率。醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理由于活的增殖細胞具有吸收四甲基偶氮唑鹽（MTT）的能力，活化的線粒體能裂解四氮唑環(huán)而產(chǎn)生顏色反應(yīng)，并借助酶標(biāo)儀于波長570nm下測吸光值作為判斷指標(biāo)。MTT法簡單易行，常被一般實驗室采用。該試驗可檢測細胞的增殖和細胞毒活性。

2.淋巴細胞參與的細胞毒性試驗（LMC-T）

系檢測CTL的方法。當(dāng)CTL再次接觸靶抗原時，即表現(xiàn)出破壞、溶解靶細胞的特性。這種特性稱為LMC，檢測時將受試者外周血單個核細胞（效應(yīng)細胞）與傳代的51Cr標(biāo)記的腫瘤細胞（靶細胞）按一定的效靶比例混合，于37℃孵育一定時間，離心后用γ計數(shù)器測定上清同位素強度，其強度與效應(yīng)細胞的細胞毒性成正比。按下式計算溶解百分率作為判斷指標(biāo)?？赏ㄟ^測定腫瘤患者CTL對腫瘤細胞的殺傷力，判斷患者的預(yù)后和觀察其療效。

溶解百分率＝（實驗組cpm-自發(fā)釋放組cpm）×100％/（最大釋放組cpm-自發(fā)釋放組cpm）

3.T細胞功能的體內(nèi)測定法

在臨床上常用的方法是體內(nèi)皮試法，細胞免疫功能正常者可出現(xiàn)硬結(jié)、紅斑等陽性反應(yīng)，細胞免疫功能低下者常呈弱陽性或陰性反應(yīng)。臨床上常作為某些病原微生物感染的診斷和觀察腫瘤患者的細胞免疫狀態(tài)、療效、及其預(yù)后的指標(biāo)。①生物性抗原皮膚試驗：分為特異性與非特異性兩類，前者包括以結(jié)核菌素（OT）、純蛋白衍生物（PPD）及鏈激酶-鏈道酶（SK-SD）等為抗原的皮膚試驗，其中以舊結(jié)核菌素皮膚試驗應(yīng)用最為普遍。定量注射上述抗原于前臂屈側(cè)皮內(nèi)，24～48小時觀察結(jié)果，局部出現(xiàn)紅腫，硬結(jié)者（＞0.5cm）為陽性。后者多用有絲分裂原如植物血凝素（PHA）作皮膚試驗，一般在注射后6～12小時局部出現(xiàn)紅斑、硬結(jié)，24～48小時可達高峰，硬結(jié)大于1.5cm為陽性。在特異性抗原皮試中，醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理若受試者從未接觸過所試抗原，則多不出現(xiàn)陽性反應(yīng)，因而往往作兩種以上抗原皮試，以對受試者的細胞免疫功能作出綜合評價。②化學(xué)性半抗原皮試：此類半抗原常用二硝基氯苯（DNCB）和二硝基氟苯（DNFB），皆系小分子物質(zhì)，進入皮膚后即與組織蛋白結(jié)合，構(gòu)成完全抗原并引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)。試驗時先將受試者致敏，即將1％DNCB或DNFB丙酮溶液涂于前臂皮膚，24小時后洗去并于2～3周后再以小劑量DNCB或DNFB涂于同側(cè)或?qū)?cè)皮膚，以24~48小時后發(fā)生紅腫、硬結(jié)、水泡或潰瘍?yōu)殛栃?。細胞免疫功能低下或缺陷者，常呈弱陽性或陰性反?yīng)。但由于局部反應(yīng)較大，病人難以接受。