超速離心:
超速離心是分離亞細胞及蛋白質大分子的有效手段醫(yī)學|教育網|搜集整理,往往是進一步純化的第一次過篩。超速離心又分差速離心和梯度離心。差速離心系指低速與高速離心交替進行,用于分離大小差別較大的顆粒。梯度密度離心是一種區(qū)帶分離法,通過梯度密度來維持重力的穩(wěn)定性。通過離心,沉淀的顆粒比液體的比重大,漂浮的顆粒比液體的比重小。通常待分離的懸液中的顆粒比液體重,假如要使之上浮,必須加入第三種成分,使其密度連續(xù)或不連續(xù)地升高,形成所謂梯度。第三種成分多用甘油、蔗糖、氯化銫或氯化銣等。假如梯度柱的范圍所表現(xiàn)的密度同待分離顆粒的密度大致相等時,則經過較長時間離心可得到分離。這種方法稱為密度離心或梯度離心。
用超速離心或梯度離心分離和純化抗原只是一種根據(jù)抗原的比重特點分離的方法,除個別成分外,極難將某一抗原成分分離出來。目前僅用于少部分大分子抗原,如IgM、C1q、甲狀腺球蛋白等,以及一些比重較輕的抗原物質如載脂蛋白A、B等。對于大量的中、小分子量蛋白質,多不適宜用超速及梯度密度離心作為純化手段。