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酶活性測定的方式

2019-09-29 11:02 來源:
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酶促反應(yīng)速度的測定可采用兩種方式:

一、測定完成一定量反應(yīng)所需的時間;

二、測定單位時間內(nèi)的酶促反應(yīng)量。前者稱為終點法,后者稱為動力學(xué)法。

終點法

該方式是在特定條件下,將樣品中要檢知的酶作用一定量的底物,然后根據(jù)反應(yīng)進(jìn)行到某一程度(即達(dá)到某一指標(biāo))所需要的時間長短來估計酶的活力。

其一個發(fā)展是采用檢測器對反應(yīng)進(jìn)行連續(xù)跟蹤,并在反應(yīng)達(dá)到某一程度時,精確地自動記錄所需要的時間,這就是酶分析自動化中的固定濃度法;另一個發(fā)展是作成簡便的酶檢測紙片。

動力學(xué)法

該方式測定原理是:在一定條件下,酶促反應(yīng)速度和酶濃度成正比,因此測得反應(yīng)速度就需要求得酶濃度。待測的酶濃度是影響反應(yīng)速度的唯 一 因素,其他因素都應(yīng)處于最適于酶發(fā)揮催化作用的水平,為此應(yīng)選擇適宜的底物濃度、緩沖體系、溫度,并向反應(yīng)系統(tǒng)中添加必要的輔助因子。

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