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1.凝固法
也稱為生物學法,將凝血因子或激活劑加入到血漿中,使血漿發(fā)生凝固,凝血儀記錄血漿凝固過程中一系列的變化(如光、電、機械運動等),并將這些變化的信號轉變成數據,計算機處理分析后得出檢測結果。
目前在凝血儀上使用的凝固法大致分為三類:光學法、黏度法和電流法。
(1)光學法:待測血漿在凝固過程中,纖維蛋白原逐漸轉變?yōu)槔w維蛋白,其理學性質也發(fā)生改變,透射光和散射光強度發(fā)生改變,凝血儀根據這種光學性質的改變來判斷凝固終點。光學法可分為透射比濁法和散射比濁法。
(2)黏度法:在待測血漿中加入小磁珠,利用變化的磁場使小磁珠產生運動,隨血漿的凝固,血液黏度增加,小磁珠的運動逐漸減弱,儀器根據小磁珠運動強度的變化來確定凝固終點。
(3)電流法:該法將待測血漿作為電路的一部分,由于纖維蛋白具有導電性,可利用電流的斷與否來判斷纖維蛋白的形成與否,即判斷凝固終點。
2.發(fā)色底物法
該法主要是利用測定產色物質的吸光度變化來推算所測定物質的含量。
基本原理為:首先人工合成含某種活性酶裂解點的化合物,此化合物上連接有產色物質(如對硝基苯胺,PNA),待測血漿中含有活性酶或往樣品中加入活性酶,化合物中的產色物質可被裂解下來,使待測樣本出現顏色變化,根據此顏色變化可推算出被檢物質的含量。
一般產色物質選用PNA,游離的PNA呈黃色,測定波長為405nm,而連接PNA的化合物為無色。
利用該法檢測的物質有ATⅢ、PLG、PC、PS等。
3.免疫學法
利用抗原抗體的特異性結合反應來對被測物質進行定量。
自動凝血儀多采用免疫比濁法進行測定,又分為透射免疫比濁法和散射免疫比濁法。
利用該法檢測的物質有D-二聚體等。
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