免疫濁度法本質上屬于液體內沉淀反應，其特點是將現(xiàn)代光學測量儀器、自動化檢測系統(tǒng)和免疫沉淀反應相結合，可進行液體中微量抗原、抗體及小分子半抗原定量檢測。

　　（一）免疫濁度法原理

　　當可溶性抗原與相應抗體在兩者比例合適時，抗原抗體在特殊緩沖液中快速形成抗原抗體復合物，使反應液出現(xiàn)濁度，如形成的復合物增加，反應液的濁度隨之增加，與一系列的標準品對照，即可計算出受檢物的含量。

　　按照儀器設計的不同分為透射比濁儀測定法和散射比濁儀測定法。測定方法又可分為速率法和終點法。

　　1.免疫透射比濁法：

　　根據(jù)郎伯-比爾（Lambert-Beer）定律，當光線通過抗原抗體反應系統(tǒng)時，由于溶液中存在抗原抗體復合物，光線被吸收。吸收的量和復合物的量成正比。利用透射比濁儀測量出由于反射、吸收或散射引起的入射光衰減，醫(yī)學教育網(wǎng)整理其濁度以吸光度A表示，A值反映了入射光與透射光的比率。

　　C：溶液濃度

　　K：常數(shù)或cd

　　c：分子吸光系數(shù)

　　d：光路長

　　2.免疫速率散射比濁法：

　　其原理是指一定波長的光通過溶液遇到抗原抗體復合物時，光線被折射，發(fā)生偏轉。偏轉角度可以從0-90°，這種偏轉的角度可因光線的波長和復合物大小不同而有所區(qū)別。散射光的強度與復合物的含量成正比，即待測抗原越多，形成的復合物也越多，散射光也越強。同時也和散射夾角成正比，和波長呈反比。

　　測定方法有終點法和速率法兩種。

　　終點法是在抗原-抗體反應達到平衡時，即復合物形成后作用一定時間，通常是30-60min，復合物濁度不再受時間的影響，但又必須在聚合產(chǎn)生絮狀沉淀之前進行濁度測定。

　　速率法是在抗原抗體結合反應的過程中，在單位時間內兩者結合的速度。速率法是測最大反應的速度，即反應達到頂峰時的峰值?？乖贵w結合反應在幾十秒內得出結果，峰值的高低與抗原的量成正比，峰值出現(xiàn)的時間和抗體濃度、抗原抗體的親和力直接相關。速率法的靈敏度和特異性都比終點法好。

　　但是，必須指出的是對免疫濁度法存在難以克服的鉤狀效應。即在定量抗體中加入抗原量達到最佳比例時，形成的IC量最大，反應速度最快。如繼續(xù)加入抗原，形成IC的量不但不再增加，反而減少；反之，在定量抗原中加入抗體，在抗體過量時也會產(chǎn)生同樣的現(xiàn)象。這種后帶（抗原過量）和前帶（抗體過量），統(tǒng)稱為鉤狀效應（hook effect）。醫(yī)學教育網(wǎng)整理鉤狀效應可以產(chǎn)生假象的弱陽性或假陰性結果。

　?。ǘ?strong>與免疫濁度法測定密切相關的因素有：

　　1.抗原與抗體的比例：理想狀態(tài)是抗原與抗體比例合適全部結合，事實上有困難，根據(jù)Heidelberger曲線理論，反應液中保持抗體過量時，復合物隨抗原量的增加遞增至抗原與抗體兩者比例最合適時達高峰，因此免疫濁度法中保持抗體過量；

　　2.抗體的質量：應是特異性強、效價高、親和力強、并使用R型抗血清；

　　3.抗原抗體反應的溶液：關鍵是pH及離子種類，通常用磷酸鹽緩沖液作反應液；

　　4.增濁劑的應用：通常用非離子型親水劑，如聚乙二醇（PEG）、吐溫-20等。