一、體內試驗

　　B細胞受抗原或促有絲分裂原刺激后，可行分裂增殖并分化成熟為抗體生成細胞，且分泌相應的Ig。B細胞功能減低或缺陷，可表現(xiàn)為體內Ig和血型抗體量下降或缺如，患者對外源性抗原的應答能力減弱或缺如，僅產生極低或不能產生特異性抗體，故臨床定量測定受檢者血清中各種Ig量和相應血型抗體，可判斷B細胞功能，也是診斷體液免疫缺陷的指標。反之，如血清中一種或多種Ig或輕、重鏈片段異常增高，表明B細胞產生Ig的功能異常增高。此外給患者注射適量常用的抗原，如白喉類毒素、破傷風類毒素等蛋白質抗原，或肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌等多糖抗原，經一定誘導期后，用適當?shù)姆椒y定受檢者血清中相應抗體的效價，根據(jù)抗體的水平也可判斷受檢者體內B細胞的功能。實驗室常用如下的體外試驗檢測B細胞功能。

　　二、B細胞早期活性指標的測定

　　B細胞經不同抗原激發(fā)即開始分化增殖，初期表現(xiàn)為體積增大，可用儀器加以檢測。激活的B細胞表面MHCⅡ類抗原的表達增多，可用相應的單克隆抗體通過熒光免疫或ABC法檢測。

　　三、溶血空斑形成試驗

　　經典的溶血斑試驗用于檢測實驗動物抗體形成細胞的功能，其原理是將綿羊紅細胞（SRBC）免疫小鼠，4天后取出脾細胞，加入SRBC及補體，混合在溫熱的瓊脂溶液中，澆在平皿內或玻片上，使成一蒲層，置37溫育。由于脾細胞內的抗體生成細胞可釋放抗SRBC抗體，使其周圍的SRBC致敏，在補體參與下導致SRBC溶血，形成一個肉眼可見的圓形透明溶血區(qū)而成為溶血空斑（plaque）。每一個空斑表示一個抗體形成細胞，空斑大小表示抗體生成細胞產生抗體的多少。這種直接法所測至的細胞為IgM生成細胞，其它類型Ig由于溶血效應較低，不能直接檢測，可用間接檢測法，即在小鼠脾細胞和SRBC混合時，再加抗鼠Ig抗體(如兔抗鼠Ig)，使抗體生成細胞所產生的IgG或IgA與抗Ig抗體結合成復合物，此時能活化補體導致溶血，稱間接空斑試驗。

　　但是上述直接和間接空斑形成試驗都只能檢測抗紅細胞抗體的產生細胞，而且需要事先免疫，難以檢測人類的抗體產生情況。如果用一定方法將SRBC用其它抗原包被，則可檢查與該抗原相應的抗體產生細胞，這種非紅細胞抗體溶血空斑試驗稱為空斑形成試驗，它的應用范圍較大。

　　現(xiàn)在常用的為SPA-SRBC溶血空斑試驗。SPA能與人及多數(shù)哺乳動物IgG的Fc段呈非特異性結合，利用這一特征，首先將SPA包被SRBC，然后進行溶血空斑測定，可提高敏感度和應用范圍。在該測試系統(tǒng)中，加入抗人Ig抗體，可與受檢細胞產生的免疫球蛋白結合形成復合物，復合物上的Fc段醫(yī)學教 育網 搜集 整理可與連接在SRBC上的SPA結合，同時激活補體，使SRBC溶解形成空斑。此法可用于檢測人類外周血中的IgG產生細胞，與抗體的特異性無關。用抗IgA、IgG或IgM抗體包被SRBC，可測定相應免疫球蛋白的產生細胞，這種試驗稱為反相空斑形成試驗。

　　溶血空斑形成試驗可用于測定藥物和手術等因素對體液免疫功能的影響，或評價免疫治療或免疫重建后機體產生抗體的功能。

　　四、B細胞增殖能力的試驗

　　（一）不同刺激物誘發(fā)增殖試驗

　　抗IgM抗體和細菌脂多糖均能刺激B細胞增殖，培養(yǎng)1～3天以后，加3H-TdR，與淋巴細胞增殖試驗一樣，檢測細胞內cpm，計算促有絲分裂原對淋巴細胞的刺激指數(shù)。也可用臺盼藍醫(yī)學教 育網     搜 集 整理法計細胞增殖或用DNA特異性染色觀察胞內DNA或RNA的分化程度。

　?。ǘ┢咸亚蚓T導試驗

　　葡萄球菌CowenⅠ株（SAC）表面富含SPA。該試驗不依賴T細胞的參與，操作原則是將SAC與淋巴細胞按一定比例混合，按增殖試驗法同樣操作和計數(shù)cmp值。葡萄球菌表面SPA含量與激發(fā)B細胞轉化能力成正比。