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排斥反應(yīng)的免疫檢驗(yàn)簡(jiǎn)介

2009-11-05 14:28 來源:
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  排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí),受者體內(nèi)的免疫應(yīng)答將發(fā)生一系列變化,檢測(cè)機(jī)體免疫狀態(tài)可診斷或推測(cè)排斥反應(yīng)的發(fā)生。

  一、體液免疫水平檢測(cè)

  相關(guān)免疫指標(biāo)包括:AB0血型、其他血型和HLA抗體,以及抗供者組織細(xì)胞抗體、血管內(nèi)皮細(xì)胞抗體、冷凝集素抗體等。測(cè)定方法可以根據(jù)相應(yīng)抗原的特性,采取各種交叉配型、補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒性試驗(yàn)等醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

  二、細(xì)胞免疫水平檢測(cè)

  包括參與細(xì)胞免疫的有關(guān)細(xì)胞數(shù)量、功能和細(xì)胞因子水平的檢測(cè)。

  1.外周血T細(xì)胞及其亞類的計(jì)數(shù):測(cè)定T細(xì)胞總數(shù)、CD4+亞群、CD8+亞群及CD4+T/CD8+T比值。在急性移植排斥反應(yīng)臨床癥狀出現(xiàn)前1~5天,CD4+T/CD8+T、細(xì)胞比值可升高至1.2以上,而此比值小于1.08時(shí)則懷疑有感染的可能。

  2.4小時(shí)T細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)是檢測(cè)受者致敏T細(xì)胞的一種方法。該法取外周血單個(gè)核細(xì)胞,不經(jīng)培養(yǎng)直接加入3H-TdR,置C02培養(yǎng)箱溫育4小時(shí),是一項(xiàng)預(yù)報(bào)急性排斥反應(yīng)危象較為滿意的試驗(yàn)。

  3.NK細(xì)胞活性測(cè)定:大量免疫抑制劑的應(yīng)用,造成受者機(jī)體NK細(xì)胞活性的抑制,但在急性排斥反應(yīng)時(shí)明顯升高。

  4.細(xì)胞因子的測(cè)定:IL-1、IL-2、IL4、IL-6、IFN-7和slL-2R等的檢測(cè),已作為監(jiān)測(cè)移植排斥反應(yīng)的常用項(xiàng)目。這些細(xì)胞因子的水平均可升高。應(yīng)用免疫標(biāo)記法檢測(cè)受者血清中細(xì)胞因子時(shí)只能對(duì)接受移植物前后的變化進(jìn)行對(duì)比分析,僅作參考。血清肌酐值和IL-2R若同時(shí)增高,則對(duì)急性移植排斥反應(yīng)的發(fā)生有診斷意義。

  骨髓移植中發(fā)生的GVHR是移植排斥反應(yīng)的特殊類型。臨床實(shí)驗(yàn)室可采用有限稀釋分析法,計(jì)數(shù)供者外周血單個(gè)核細(xì)胞中分泌IL-2的特異性T細(xì)胞比值。此比值≥1/10萬(wàn),判斷為有發(fā)生GVHR的可能;若小于此比值,則提示不發(fā)生GVHR.該法為單向MLC,但又不同于一般的MLC.供者外周血單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)有限稀釋法稀釋成單個(gè)細(xì)胞,然后在體外兩次接受受者細(xì)胞的刺激,即供者外周血稀釋后與20Gy放射性照射的受體外周血單個(gè)核細(xì)胞混合培養(yǎng)14小時(shí),洗去上清液后再加入40Gy放射性照射的經(jīng)EB病毒轉(zhuǎn)化的宿主B細(xì)胞(該細(xì)胞本身并不產(chǎn)生IL-2,但對(duì)供者T細(xì)胞具有更強(qiáng)的刺激和誘生IL-2之作用),經(jīng)24小時(shí)培養(yǎng)后,取上清液測(cè)IL-2活性醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

  5.粘附分子及其配體的檢測(cè):粘附分子及其配體的表達(dá)與急性排斥反應(yīng)的發(fā)生密切相關(guān)。諸如ELAM-1、VCAM、ICAM和HLA分子等。

  三、補(bǔ)體水平的檢測(cè)

  在移植物遭受排斥時(shí),補(bǔ)體成分的消耗增加,含量減少。血清總補(bǔ)體和單個(gè)補(bǔ)體成分活性或補(bǔ)體的裂解產(chǎn)物,如C3a、C3b、C3d等的測(cè)定,對(duì)于了解補(bǔ)體的活性很有幫助。檢測(cè)方法有:免疫電泳、免疫標(biāo)記技術(shù)等。檢測(cè)凝血系統(tǒng)、纖溶系統(tǒng)、激肽系統(tǒng)活性,也有助于補(bǔ)體活性水平的判斷。

  四、急性時(shí)相反應(yīng)物質(zhì)的檢測(cè)

  C反應(yīng)蛋白(CRP)、IL-1、IL-6、TNF-a以及HSP等炎癥分子,在發(fā)生感染和自身免疫性疾病時(shí)均有不同程度的增高。同種異基因干細(xì)胞移植時(shí)CRP升高,移植后發(fā)生細(xì)菌或真菌感染時(shí)CRP增高更為顯著。在肝、腎移植中,CRP的動(dòng)態(tài)測(cè)定結(jié)果與器官移植后并發(fā)癥的發(fā)生相關(guān),且比白細(xì)胞計(jì)數(shù)或發(fā)燒更敏感。CRP的測(cè)定尚未作常規(guī)項(xiàng)目,但外科創(chuàng)傷、急性排斥反應(yīng)的發(fā)生以及感染等的關(guān)系,正被認(rèn)可。

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