免疫細(xì)胞計(jì)數(shù):
(一)熒光抗體染色
應(yīng)用范圍廣泛,可分別使用于B細(xì)胞、T細(xì)胞及其亞類、MФ及NK細(xì)胞的計(jì)數(shù)及表面標(biāo)記的測定,多選用間接熒光抗體染色,即活細(xì)胞與其特異性單抗作用后再與熒光抗球蛋白抗體反應(yīng),經(jīng)熒光顯微鏡觀察可見膜熒光。
(二)花環(huán)形成試驗(yàn)
T細(xì)胞與B細(xì)胞皆可應(yīng)用該試驗(yàn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)T細(xì)胞的方法稱E花環(huán)形成試驗(yàn),即取外周血淋巴細(xì)胞與綿羊紅細(xì)胞(SRBC)混合,在一定溫度下作用一定時間,使SRBC與T細(xì)胞表面的E受體結(jié)合,醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理形成以T細(xì)胞為中心,繞有SRBC的花環(huán)樣細(xì)胞集團(tuán)。B細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法有EA花環(huán)形成試驗(yàn)EAC花環(huán)形成試驗(yàn),前者將紅細(xì)胞(E)與相應(yīng)抗體(A)結(jié)合成EA懸液,再與受試者的淋巴細(xì)胞混合,經(jīng)制片染色后鏡檢,計(jì)數(shù)花環(huán)形成率;EAC花環(huán)試驗(yàn)僅在EA花環(huán)基礎(chǔ)上加上補(bǔ)體,使先形成EAC,再與受試淋巴細(xì)胞混合。EA和EAC花環(huán)試驗(yàn)分別根據(jù)B細(xì)胞表面存在著FcγR和補(bǔ)體受體。主要應(yīng)用于淋巴細(xì)胞的分離。
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