對流免疫電泳原理：

原理

在一定條件下，膠體顆粒是帶有電荷的，這些帶電膠體顆粒在電的影響下發(fā)生移動。如膠體顆粒帶負(fù)電，則移向陽極；反之，移向陰極。這種現(xiàn)象稱為電泳。

對流免疫電泳是將病人血清（待檢抗原）放在瓊脂板陰極端孔內(nèi)，已知抗血清（含有已知抗體）放于陽極端孔內(nèi)，在堿性環(huán)境條件下同時進(jìn)行電泳，抗原由陰極向陽極移動快，醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理而抗體系丙種球蛋白，等電點(diǎn)在pH6～7之間，故帶負(fù)電荷少，移動速度慢，由于電滲作用結(jié)果向陰極倒退，于是抗原抗體在電場中相遇，當(dāng)兩者比例適當(dāng)時，則特異性抗原抗體互相結(jié)合，便形成肉眼可見的白色沉淀線。

材料

1.1%，PH8.6，0.075M巴比妥緩沖液。

2.抗AFP血清，已知AFP陽性血清，待檢病人血清。

3.玻片、吸管、打孔器、毛細(xì)滴管、電泳儀等。

方法

1.將用緩沖液配制好的1.2%瓊脂隔水加熱溶化，趁熱吸取3.5ml加于玻片上，冷凝后打孔，孔直徑3毫米，二孔間距離3毫米。

2.分別從上至下向左列1、3、5孔內(nèi)加入抗AFP血清；向右列2孔內(nèi)加待檢病人血清，4孔內(nèi)加已知AFP陽性血清作為陽性對照，6孔內(nèi)加已知陰性對照血清。各孔加滿為度，勿使外溢。

3.將瓊脂板置于電泳槽內(nèi)，抗原端入陰極側(cè)，抗體放陽極側(cè)，二端貼上浸透電泳緩沖液的4層紗布條。

4.通電，固定電壓5-6伏/厘米長，通電45～60分鐘左右。

結(jié)果觀察電泳畢，關(guān)閉電源，取出瓊脂板。在黑色背景上方，透過散射光線，首先觀察3與4孔間（陽性對照組）、5與6孔間（陰性對照組）的白色沉淀線是否出現(xiàn)；再看試驗(yàn)孔，如孔間未出現(xiàn)這樣的沉淀線，則該待檢血清為AFP陰性血清。