B淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志的測定原理

人類B細(xì)胞表面帶SmIg，每一個(gè)B細(xì)胞表面帶有不同類的Ig，即IgM、IgD、IgG、IgA、或IgE.如用熒光法標(biāo)記的抗人IgM、IgD、IgG、IgA及IgE抗體，分別同標(biāo)記的熒光抗體染色，則熒光抗體與B細(xì)胞表面相應(yīng)的SmIg結(jié)合，在熒光顯微鏡下觀察，凡與熒光標(biāo)記抗體結(jié)合的細(xì)胞則細(xì)胞膜呈現(xiàn)熒光，為SmIg陽性細(xì)胞，即B細(xì)胞，同時(shí)用普通光源照明，醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理計(jì)數(shù)該視野的淋巴細(xì)胞總數(shù)，根據(jù)發(fā)熒光和不發(fā)熒光細(xì)胞的計(jì)數(shù)，可求得帶各類SmIg細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)。把這些數(shù)相加為血液中B細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)。

試劑

（1）異硫氰熒光素（FITC）標(biāo)記的兔抗人IgG，兔抗人IgM抗體，F(xiàn)/P在分子比值為1～2.

（2）Hank液（含1.0g/L.NaN3），調(diào)pH至7.4.

（3）聚蔗糖-泛影葡胺淋巴細(xì)胞分層液（比重1.077）。

（4）50%PBS緩沖甘油。