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化學發(fā)光標記免疫測定

2016-02-17 15:59 來源:
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化學發(fā)光標記免疫測定亦稱化學發(fā)光免疫測定(chemiluminescentimmunoassay,CLIA),是用化學發(fā)光劑直接標記抗原或抗體的一類免疫測定方法。用作標記的化學發(fā)光劑應符合以下幾個條件:①能參與化學發(fā)光反應;②與抗原或抗體偶聯(lián)后能形成穩(wěn)定的結合物試劑;③偶聯(lián)后仍保留高的量子效應和反應動力;④應不改變或極少改變被標記物的理化特性,特別是免疫活性。魯米諾類和吖啶酯類發(fā)光劑等均是常用的標記發(fā)光劑。

魯米諾類的發(fā)光反應須有催化劑(例如過氧化物酶)催化,且與蛋白質(zhì)或肽結合后其發(fā)光作用減弱,因此魯米諾類在CLEIA中是很好的底物,但已較少用于CLIA的標記。吖啶酯類對CLIA更為適用,其顯著的優(yōu)點是:①氧化反應不需催化劑,只要堿性環(huán)境中就可以進行。反應物在加入H2O2后再加氫化鈉溶液,發(fā)光反應迅速,本底低。②在氧化反應過程中,結合物被分解,因此游離的吖啶酯的發(fā)光不受抑制。試劑穩(wěn)定性好。

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