酶擴(kuò)大免疫測(cè)定技術(shù)-免疫檢驗(yàn):
酶擴(kuò)大免疫測(cè)定技術(shù)是最早取得實(shí)際應(yīng)用的均相酶免疫測(cè)定方法醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理,是由美國(guó)Syva公司研究成功并定名的。此法主要檢測(cè)小分子抗原或半抗原,在藥物測(cè)定中取得較多應(yīng)用。酶擴(kuò)大免疫測(cè)定技術(shù)(enzyme-multipliedimmunoassaytechnique,EMIT)試劑盒的商標(biāo)取名為EMIT.
EMIT的基本原理是半抗原與酶結(jié)合成酶標(biāo)半抗原,保留半抗原和酶的活性(圖15-2B)。當(dāng)酶標(biāo)半抗原與抗體結(jié)合后,所標(biāo)的酶與抗體密切接觸,使酶的活性中心受影響而活性被抑制(圖15-2A)。EMIT試劑盒中的主要試劑為:①抗體,②酶標(biāo)半抗原,③酶的底物。檢測(cè)對(duì)象為標(biāo)本中的半抗原。當(dāng)試劑①、②與標(biāo)本混合后,標(biāo)本中的半抗原與酶標(biāo)的半抗原競(jìng)爭(zhēng)性地與試劑中的抗體相結(jié)合。如標(biāo)本中的半抗原量少,與抗體結(jié)合的酶標(biāo)半抗原的比例增高,游離的具有酶活力的酶標(biāo)半抗原的量就減少。因此在反應(yīng)后酶活力大小一標(biāo)本中的半抗原呈一定的比例,從酶活力的測(cè)定結(jié)果就可推算出標(biāo)本中半抗原的量。