B細(xì)胞表面標(biāo)志的檢測簡介：

B細(xì)胞具有多種特異性抗原和受體，據(jù)此建立了相應(yīng)的檢測方法，一般用以研究B細(xì)胞各分化發(fā)育階段的特性，也可藉以鑒定和計(jì)數(shù)各階段B細(xì)胞在人外周血和淋巴樣組織的分布以及疾病時(shí)的變化動(dòng)態(tài)，為臨床提供診治相關(guān)疾病的有用信息。

一、B細(xì)胞表面抗原的檢測

B細(xì)胞表面有CD19、CD20、CD21、CD22和CD29等分化抗原，其中有些系全部B細(xì)胞所共有，而有些僅活化B細(xì)胞所特有，據(jù)此可用相應(yīng)的CD系列單克隆抗體，通過間接熒光免疫法、酶免疫組化或ABC法加以檢測醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜|集整理。健康成年人外周血CD20陽性細(xì)胞約占淋巴細(xì)胞總數(shù)的8%～12%.

二、B細(xì)胞受體的檢測

B細(xì)胞表面有膜免疫球蛋白（SmIg）、Fc受體、補(bǔ)體受體、EB病毒受體和小鼠紅細(xì)胞受體，其中以SmIg為B細(xì)胞所特有，是鑒定B細(xì)胞可靠的指標(biāo)。

（一）SmIg的檢測

大多采用間接熒光免疫法或包括ABC法在內(nèi)的酶免疫組化法，關(guān)鍵是選用高效價(jià)、高特異性和高和力的熒光或酶標(biāo)記的多價(jià)抗人Ig抗體，也可分別用各種類型的Ig，即IgM、IgG、IgA、IgE等抗血清，檢測帶有各種類型Ig的B細(xì)胞，在人外周血中以帶有SmIgM的細(xì)胞數(shù)為最多。

B細(xì)胞經(jīng)熒光標(biāo)記的抗Ig抗體染色，細(xì)胞膜表面呈現(xiàn)的熒光著色可有不同的形式，開始均勻分布呈環(huán)狀，其后集中在某些部位呈斑點(diǎn)狀，然后又可集在一個(gè)部位呈帽狀，最后可被吞飲入胞漿直至熒光消失。這一現(xiàn)象是由于淋巴細(xì)胞膜由雙層類脂組成，上嵌有蛋白分子，在體溫條件下，膜呈半液體狀，而鑲嵌物能在其中移動(dòng)。當(dāng)SmIg抗體發(fā)生結(jié)合時(shí)，由于抗血清為雙價(jià)，使SmIg出現(xiàn)交聯(lián)現(xiàn)象，這種抗原與抗體結(jié)合物可連成斑點(diǎn)和帽狀，時(shí)間過長，帽狀結(jié)合物可脫落或被吞飲而消失，因此染色后，觀察時(shí)間不能超過30min，或在染色時(shí)加疊氮鈉防止帽狀物形成或被吞飲。

（二）Fc受體和補(bǔ)體受體的檢測

B細(xì)胞表面具有與IgGFc段結(jié)合的受體，極易與抗原抗體復(fù)合物中抗體Fc段牢固結(jié)合，故用相應(yīng)抗體致敏的紅細(xì)胞（EA）作批示物，在一定條件下，它能與帶Fc受體的B細(xì)胞形成EA花環(huán)，故稱EA花環(huán)試驗(yàn)。而細(xì)胞表面的補(bǔ)體受體，則能與紅細(xì)胞（E）-抗紅細(xì)胞抗體（A）-補(bǔ)體（C）復(fù)合物（EAC）中的補(bǔ)體相結(jié)合，從而建立EAC花環(huán)試驗(yàn)。但由于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、NK以及部分T細(xì)胞也帶有Fc或補(bǔ)體受體。因此形成EA和EAC花環(huán)并非B細(xì)胞所特有，加上該類試驗(yàn)需制備新鮮指示物，操作麻煩，目前基本上已被其他試驗(yàn)所取代，甚少應(yīng)用。

（三）小鼠紅細(xì)胞受體的檢測

部分B細(xì)胞能與小鼠紅細(xì)胞形成花環(huán)，慢性B細(xì)胞白血病患者外周血淋巴形成小鼠紅細(xì)胞花環(huán)率高達(dá)60%～85%，但健康人該花環(huán)率僅占總淋巴細(xì)胞的5%～10%，據(jù)此推知形成該花環(huán)的性能是某些B細(xì)胞亞群的標(biāo)志，由于方法簡便，臨床可用作鑒定不同型淋巴細(xì)胞白血病。