醫(yī)學教育網(wǎng)小編整理了“補體的檢測及應用”相關(guān)知識供大家參考學習,希望對大家有所幫助!
補體Complement:是存在于人和動物血清中的一組具有酶活性的球蛋白,一般情況下處于未激活狀態(tài)。
補體的特性
穩(wěn)定性差,各種理化因素都可使之失活:如酸、堿、紫外線照射、劇烈震蕩等。
實驗室滅活補體的條件為:56℃30分鐘,室溫2-3天也可自然失活,補體檢測必須用新鮮血清。
補體的組成
1.補體的固有成分:C1-C9,其中C1又包括C1q、C1r、C1s,共9種成分11種蛋白分子。其中C9的分子量最小、C3的含量最高。
2.補體的調(diào)節(jié)蛋白:如C4調(diào)節(jié)蛋白、C1抑制物、S蛋白等。
3.補體受體:如C1qR、C3aR等。
補體的激活:
經(jīng)典激活途徑:又稱C1途徑。激活劑:IgG、IgM形成的AgAb復合物;參與成分:C1-C9;激活過程:這是一個連鎖反應,缺少其中任何一個組分,連鎖反應都不能進行下去。旁路激活途徑:又稱C3途徑。激活劑:脂多糖、酵母多糖、IgG4和IgA的聚合物(提供接觸表面); 參與成分:C3、C5-C9、B因子、D因子、P因子。
甘露糖結(jié)合凝集素途徑:又稱MBL途徑。醫(yī)學教育網(wǎng)|搜集整理在感染早期,常采用前兩個途徑,產(chǎn)生Ab后采用第一個途徑。
補體的生物學作用
溶菌、溶細胞作用(MAC效應);調(diào)理作用(C3b、C4b和iC3b);免疫黏附作用(C3b、C4b);炎癥介質(zhì)作用:趨化作用(C3a,C5a)過敏毒素作用(C3a,C4a,C5a)。
補體的檢測
功能檢測:總補體活性的檢測、單一補體活性的檢測(溶血試驗)。
量的檢測:單一補體量的檢測(免疫比濁法或單擴法)。
溶血試驗
SRBC+兔抗SRBC抗體(溶血素)+新鮮血清(提供補體)——啟動經(jīng)典激活途徑(溶血)。
指示系統(tǒng):綿羊紅細胞和溶血素。
補體來源:多只豚鼠的混合血清。
總補體活性檢測:CH50試驗。
原理:組成和功能完整的補體系統(tǒng)能使致敏羊紅細胞發(fā)生溶血;羊紅細胞的溶血程度與補體的活性成正比。
概念:在50%溶血附近(30%-70%之間),稍微改變補體量,溶血程度變化明顯,因此以50%溶血率來判定終點較100%更為敏感。
檢測結(jié)果處理:最后找到與制備好的50%溶血標準管比較,取吸光度值最接近的一管,則CH50(U/ml)=1/血清用量X稀釋倍數(shù)。
總補體活性參考范圍:50-100U/ml.
單一補體活性的檢測(溶血試驗),常用于檢測C3、C4、C1q、B因子等。
單一補體量的測定:采用免疫比濁法或單擴法,常檢測C3(含量1200-1300ug/ml)。
補體檢測的臨床意義
補體量↑:多見于急性炎癥感染、組織損傷、癌腫。