ELISA應用的范圍很廣，而且正在不斷地擴大，原則上ELISA可用于檢測一切抗原、抗體及半抗原，可以直接定量測定體液中的可溶性抗原。

酶免疫試驗（EIA）結(jié)合光學顯微鏡或電子顯微鏡可進行抗原定位與結(jié)構(gòu)的研究，用酶標記抗原或抗體結(jié)合免疫擴散及免疫電泳可提高試驗的敏感性。在實際應用方面可作疾病的臨床診斷、疾病監(jiān)察、疾病普查、法醫(yī)檢查、獸醫(yī)及農(nóng)業(yè)上的植物病害的診斷檢定等。因此，它和生物化學、免疫學、微生物學、藥理學、流行病學及傳染病學等方面密切相關(guān)。

檢查抗原和半抗原方面：在內(nèi)分泌方面已經(jīng)用于檢測雌性激素、絨毛膜促性腺激素、黃體素、胰島素、皮質(zhì)醇、促甲狀腺素和孕酮等，其敏感性與RIA相當，在血液學方面可用于檢查凝固因子（如第Ⅷ凝固因子）、紅細胞抗原及結(jié)合球蛋白（Hapto Globin）等，在腫瘤方面已試用檢查甲胎蛋白（AFP）癌胚抗原（CEA），對前者的敏感性已達到與放射免疫試驗相當?shù)乃?，但對CEA檢查的敏感性較低，目前尚不能用于常規(guī)診斷，在傳染病的診斷方面正在日益擴大，其中最滿意的是用于檢查乙型肝炎表面抗原。國內(nèi)外已有ELISA檢測的商品供應。

尚有用于檢查霍亂弧菌、大腸肝菌、綠膿桿菌和破傷風梭菌毒素；腦膜炎球菌及淋球菌抗原；檢查免疫抑制病人中常見的白色念殊菌抗原，檢查病人或病獸的糞便中的輪狀病毒醫(yī)學教育|網(wǎng)搜集整理，自病人標本中檢查甲肝病毒、皰疹病毒、麻疹病毒、流感、呼吸道融合及巨細胞病毒等。還可用于植物組織漿液中檢查植物病毒。此外尚試用于測鉤體抗原及血吸蟲病的循環(huán)抗原等。在免疫化學方面可用于檢測白蛋白，免疫球蛋白的各種組份，也可用于檢測補體成份，如：ciq，還能用于檢測蛇毒。