生物素標(biāo)記蛋白質(zhì)的方法及標(biāo)記注意
標(biāo)記方法:
(1)標(biāo)記抗體、抗原:常用于標(biāo)記抗體的活化生物是BNHS;對(duì)于偏酸性的抗原,標(biāo)記時(shí)多采用BHZ;
(2)標(biāo)記酶:以生物素標(biāo)記HRP為例。
標(biāo)記注意事項(xiàng):
(1)應(yīng)根據(jù)抗原或抗體分子結(jié)構(gòu)中所帶可標(biāo)記基團(tuán)的種類以及分子的理化性質(zhì),選擇相應(yīng)的活化生物素和反應(yīng)條件;
(2)標(biāo)記反應(yīng)時(shí),活化生物素與待標(biāo)記抗原或抗體應(yīng)有適當(dāng)?shù)谋壤?/p>
(3)為減少空間位阻影響,可在生物素與被標(biāo)記物之間加入交聯(lián)臂樣結(jié)構(gòu);
(4)生物素與抗原、抗體等蛋白質(zhì)結(jié)合后,不影響后者的免疫活性;標(biāo)記酶時(shí)則結(jié)果有不同。
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