酶免疫技術常用的酶有哪些呢?快來跟著小編了解一下吧!
1.辣根過氧化物酶(HRP):目前酶聯(lián)免疫吸附試驗中應用最廣泛的標記用酶。由無色的糖蛋白(主酶)和亞鐵血紅蛋白(輔基)結合而成的復合物。輔基是酶活性基團,而主酶則與酶活性無關,HRP的純度用RZ(HRP分別在403nm和275nm處的吸光度比值)表示,RZ值應大于3.0。
RZ值僅說明血紅素基團在HRP中的含量,并非表示HRP制劑的真正純度,而且RZ值高的HRP并不意味著酶活性也高,RZ值與酶活性無關。
酶活性以單位U表示:即1分鐘將1μmol底物轉化為產物所需的酶量。酶變性后,RZ值不變但活性降低,因此使用酶制劑時,酶活性單位比RZ值更為重要。
2.堿性磷酸酶(AP):大腸桿菌來源的AP分子量80kD,酶作用最適pH為8.0;小牛腸黏膜AP分子量為100kD,最適pH為9.6;后一種AP的活性高于前者。
3.β-半乳糖苷酶(β-Gal):β-Gal來源于大腸桿菌。因人血中缺乏此酶,以其制備的酶標志物在測定時不易受到內源性酶的干擾,從而提高特異性,被用于均相酶免疫測定。
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