免疫散射比濁法測定的原理是什么?
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溶液中的微粒受到光線照射后,微粒對光線產(chǎn)生反射和折射而形成散射光。
散射光強(qiáng)度與顆粒的分子量、數(shù)目、大小及入射光強(qiáng)度成正比,與微粒至檢測器的距離、入射光波長成反比,因此使用高強(qiáng)度光源如激光、較短波長的入射光,可提高檢測靈敏度。
當(dāng)顆粒直徑小于入射光波長的1/10時(shí),散射光強(qiáng)度在各個(gè)方向的分布均勻一致,稱為Rayleigh散射;
當(dāng)顆粒直徑大于入射光波長的1/10到接近入射光波長時(shí),隨著顆粒直徑增大,向前散射光強(qiáng)于向后散射光,稱為Debye散射;
當(dāng)顆粒直徑等于或大于入射光波長時(shí),向前散射光遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于向后散射光,稱為Mile散射。
在免疫濁度測定中,可溶性抗原與相應(yīng)抗體反應(yīng),生成的免疫復(fù)合物顆粒由小變大,而且免疫復(fù)合物顆粒的大小隨抗原抗體的比例、濃度和分子大小而變化,相應(yīng)地也會出現(xiàn)散射光強(qiáng)度隨角度而變化的情況,因此,很難用固定的公式來計(jì)算散射光的強(qiáng)度,而是采取適當(dāng)?shù)慕嵌葴y量散射光強(qiáng)度。
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