免疫組織標(biāo)本的固定與保存
免疫組織標(biāo)本的固定與保存是什么?為了幫助各位考生了解,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理如下:
1.標(biāo)本固定的目的:使細胞內(nèi)蛋白質(zhì)凝固,細胞內(nèi)分解酶反應(yīng)終止,以防止細胞自溶,保持細胞形態(tài)和結(jié)構(gòu);保存組織細胞抗原性;防止標(biāo)本脫落;除去妨礙抗體結(jié)合的類脂,便于保存;抑制組織中細菌的繁殖,防止組織腐敗和在后續(xù)組織制備中的細胞結(jié)構(gòu)和成分的改變。標(biāo)本的固定應(yīng)以不損傷細胞形態(tài),不干擾固定后抗原的識別和結(jié)合為原則。
2.固定劑的選擇:蛋白質(zhì)類抗原,可用乙醇或甲醇固定;微生物抗原可用丙酮或三氯化碳固定;如需除去病毒的蛋白質(zhì)外殼,可使用胰蛋白酶;多糖類抗原用10%福爾馬林固定或以微火加熱固定;如有黏液物質(zhì)存在,應(yīng)用透明質(zhì)酸酶等處理除去;類脂質(zhì)豐富的組織進行蛋白、多糖抗原檢測時,需用有機溶劑(乙醚、丙酮等)處理除去類脂。組織標(biāo)本常規(guī)固定液為中性緩沖甲醛。
3.制片方法的評價:冷凍和石蠟切片是免疫組化最常用的制片方法。首選冷凍切片。其操作簡便,可避免石蠟切片因固定(甲醛)、脫水、浸蠟等對抗原所造成的損失,適用于不穩(wěn)定的抗原。石蠟切片是研究形態(tài)學(xué)的主要制片方法,它不但是觀察組織細胞結(jié)構(gòu)的理想方法,而且可用在陳舊石蠟包埋材料免疫組化的回顧性研究。切片薄而有連續(xù)性,可長期保存。但對抗原的保存不如冷凍切片。
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