對流免疫電泳的原理有什么?
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在pH值8.6的瓊脂凝膠中,抗體球蛋白只帶有微弱的負電荷,而且它分子又較大,所以泳動慢,受電滲作用的影響也大,往往不能抵抗電滲作用,故在電泳時,反而向負極倒退。而一般抗原蛋白質(zhì)常帶較強的負電荷,分子又較小,所以泳動快,雖然由于電滲作用泳動速度減慢,但仍能向正極泳動。
如將抗原置陰極,抗體置陽極,電泳時,兩種成分相對泳動,一定時間后抗原和抗體將在兩孔之間相遇,并在比例適當(dāng)?shù)牡胤叫纬扇庋劭梢姷某恋砭€。這樣由于電泳的作用,不僅幫助抗體定向移動,因而加速了反應(yīng)的出現(xiàn),而且也限制了瓊脂擴散時,抗原抗體向四周自由擴散的傾向,因而也提高了敏感性,本法比瓊脂擴散法的靈敏度要高10~16倍,而且反應(yīng)時間短,可用于各種蛋白的定性和半定量測定。
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