夫志當存高遠，只要堅持、努力，勝利就會屬于你！“光譜分析”是檢驗職稱考試需要掌握的知識，那“光譜分析”是什么呢？以下是醫(yī)學教育網(wǎng)小編為大家整理得“光譜分析”相關(guān)知識，希望有助于大家備考！祝大家考試順利，取得好成績！

分類：

(一)可見及紫外分光光度法

分光光度法的理論基礎(chǔ)是朗伯-比爾定律。

1.Lamber-Beer定律：

A=k·b·c

A為吸光度

k—吸光系數(shù)

b—光徑，單位：cm

c—溶液濃度，單位：g/L

2.摩爾吸光系數(shù)：在公式“A=k·b·c”中，當c=1mol/L，b=1cm時，則常數(shù)k可用ε表示。

3.比吸光系數(shù)：在公式“A=k·b·c”中，當c為百分濃度(w/v)，b為1cm時，則常數(shù)k可用E%表示，稱為比吸光系數(shù)或百分吸光系數(shù)。

(二)原子吸收分光光度法

原子吸收分光光度法是基于元素所產(chǎn)生的原子蒸氣中待測元素的基態(tài)原子，對所發(fā)射的特征譜線的吸收作用進行定量分析的一種技術(shù)。

在一定條件下，原子的吸光度同原子蒸氣中待測元素基態(tài)原子的濃度成正比。

常用的定量方法有：

標準曲線法、標準加入法、內(nèi)標法。

1.標準曲線法

配制一系列濃度不同的標準溶液進行測定，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標繪制標準曲線。

在相同條件下處理待測物質(zhì)并測定其吸光度，即可從標準曲線上找出對應(yīng)的濃度。

影響因素較多，每次實驗都要重新制作標準曲線。

2.標準加入法

把待測樣本分成體積相同的若干份，分別加入不同量的標準品，測定各溶液的吸光度，以吸光度為縱坐標，標準品加入量為橫坐標，繪制標準曲線，用直線外推法使工作曲線延長交于橫軸，找出組分的對應(yīng)濃度。

優(yōu)點是能夠更好地消除樣品基質(zhì)效應(yīng)的影響。

3.內(nèi)標法

在系列標準品和未知樣品中加入一定量樣本中不存在的元素(內(nèi)標元素)，分別進行測定。

以標準品與內(nèi)標元素的比值為縱坐標，標準品濃度為橫坐標繪制標準曲線，再根據(jù)未知樣品與內(nèi)標元素的比值依曲線計算出未知樣品的濃度。

本法要求內(nèi)標元素應(yīng)與待測元素有相近的物理和化學性質(zhì)。

只適用于雙通道型原子吸收分光光度計。

(三)熒光分析法(發(fā)射光譜分析法)

利用熒光強度進行分析的方法，稱為熒光法。

在熒光分析中，待測物質(zhì)分子成為激發(fā)態(tài)時所吸收的光稱為激發(fā)光，處于激發(fā)態(tài)的分子回到基態(tài)時所產(chǎn)生的熒光稱為發(fā)射光。

熒光分析法測定的是受光激發(fā)后所發(fā)射的熒光強弱。

(四)火焰光度法

火焰光度法是利用火焰中激發(fā)態(tài)原子回降至基態(tài)時發(fā)射的光譜強度進行含量分析的方法。

樣品中待測元素激發(fā)態(tài)原子的發(fā)射光強度I與該元素濃度C呈正比例關(guān)系，即I=aC。式中a為常數(shù)，與樣品組成、蒸發(fā)和激發(fā)過程有關(guān)。

火焰光度法通常采用的定量方法有標準曲線法、標準加入法和內(nèi)標法。

(五)透射和散射光譜分析法

主要測定光線通過溶液混懸顆粒后的光吸收或光散射程度，常用方法為比濁法，又可稱為透射比濁法和散射比濁法。

臨床上多用于對抗原或抗體的定量分析。

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