《臨床免疫學與檢驗》重要考點（二）

1.鄰苯二胺（OPD）被認為是HRP最為敏感的色原底物之一。

2.四甲基聯(lián)苯胺（TMB）：TMB是一種優(yōu)于OPD的新型HRP色原底物。已成為目前ELISA中應(yīng)用最廣泛的底物。

3.吖啶酯是目前常用的直接標記發(fā)光劑。

4.免疫組化最常用的制片方法有冷凍和石蠟切片。首選的制片方法是冷凍切片。

5.外周血單個核細胞的分離：Ficoll分離液可作為常規(guī)的淋巴細胞分離液，主要用于分離外周血中單個核細胞，是一種單次密度梯度離心分離法，其分布由上到下依次為：稀釋的血漿層、單個核細胞層、粒細胞層和紅細胞層。

6.T細胞表面標志：CD3+CD4+CD8-輔助性T細胞；CD3+CD4－CD8+細胞毒性T細胞；CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞。

7.T細胞表面主要的CD抗原：

①CD2表達于全部人T細胞和NK細胞表面，因其能與綿羊紅細胞結(jié)合，又稱為綿羊紅細胞受體。

②CD3是一種多鏈的糖蛋白，表達于全部T細胞表面，是T細胞的表面標志，是TCR-CD3復合物的重要組成部分。

③CD4/CD8：CD4和CD8分子分別表達于外周血不同的T細胞亞群表面，是區(qū)分T細胞亞群的重要標志。表達CD4的主要是輔助性T細胞，表達CD8的主要是細胞毒性T細胞。

8.膜免疫球蛋白（mIg）又稱為BCR，表達于所有成熟的B細胞和大多數(shù)B細胞瘤的細胞表面，屬于免疫球蛋白超家族原型，是B細胞最具特性的表面標志。

9.NK細胞的表面標志：目前NK標志以CD3-、CD16+、CD56+為公認。

10.T細胞功能檢測：T細胞增殖試驗、T細胞分泌功能測定、T細胞介導的細胞毒試驗和體內(nèi)試驗（特異性抗原皮膚試驗和PHA皮膚試驗）。

11.B細胞功能檢測：B細胞增殖試驗和溶血空斑試驗。

12.溶血空斑試驗：每一個空斑中央含一個抗體形成細胞，空斑數(shù)目即為抗體形成細胞數(shù)。空斑大小表示抗體形成細胞產(chǎn)生抗體的多少。

13.中性粒細胞功能檢測：趨化功能檢測、吞噬和殺菌功能測定（NBT還原試驗）。

14.巨噬細胞功能檢測：炭粒廓清試驗、吞噬功能檢測、巨噬細胞溶酶體酶的測定、細胞毒作用測定和巨噬細胞促凝血活性測定。

15.前向散射光（FS）：信號的強弱與細胞的體積成正比，因此可以說FS是用于檢測細胞或其他粒子物體的表面屬性。

16.側(cè)向散射光（SS）：SS信號的強弱與細胞或其他顆粒形狀及粒度成正比。SS用于檢測細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)屬性，可獲得有關(guān)細胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)和顆粒性質(zhì)的參數(shù)。

17.時間分辨熒光免疫測定中多用Eu3+和Tb3+為標志物，其中Eu3+最為常用。

18.超敏反應(yīng)的分型：Ⅰ型超敏反應(yīng)，即速發(fā)型超敏反應(yīng)；Ⅱ型超敏反應(yīng)，即細胞毒型或細胞溶解型超敏反應(yīng)；Ⅲ型超敏反應(yīng)，即免疫復合物型或血管炎型超敏反應(yīng)；IV型超敏反應(yīng)，即遲發(fā)型超敏反應(yīng)。

19.Ⅰ型超敏反應(yīng)的主要特征有：①超敏反應(yīng)發(fā)生快，消退快；②常引起生理功能紊亂，較少發(fā)生嚴重的組織細胞損傷；③由特異性IgE型抗體介導，無補體參與；④具有明顯的個體差異和遺傳背景。

20.常見Ⅰ型超敏反應(yīng)性疾病：①藥物過敏性休克（青霉素引發(fā)的過敏性休克最為常見）；②血清過敏性休克；③呼吸道過敏反應(yīng)；④消化道過敏反應(yīng)；⑤皮膚過敏反應(yīng)（可由藥物、食物、油漆、腸道寄生蟲或冷熱刺激等引起。病變以皮疹為主，特點是劇烈瘙癢。）

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