體內(nèi)藥物分析的特點(diǎn)

①樣品復(fù)雜，干擾物質(zhì)多

②樣品量少，藥物濃度低

③工作量大，測定數(shù)據(jù)的處理和闡明有時不太容易

生物樣品前處理方法

蛋白質(zhì)的去除；綴合物的水解；樣品的分離、純化與濃縮；濃縮

對檢測方法的要求

檢測方法要具有高靈敏度和高專屬性

生物樣品測定方法的基本要求

專屬性

專屬性是分析方法測量和區(qū)分共存組分中分析物的能力，既能證明所測的藥物為原形或其代謝物，并能排除某些內(nèi)源性物質(zhì)和雜質(zhì)的干擾

標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍

1.用回歸分析方法(如用加權(quán)最小二乘法)獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.標(biāo)準(zhǔn)曲線高低濃度范圍為線性范圍。

3.用至少6個濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

精密度與準(zhǔn)確度

1.要求選擇3個濃度的質(zhì)控樣品同時進(jìn)行方法的精密度和準(zhǔn)確度考察。

2.低濃度選擇在定量下限附近，高濃度接近于標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限附近；中間選一個濃度。

3.每一濃度每批至少測定5個樣品。

4.精密度用質(zhì)控樣品的批內(nèi)和批間相對標(biāo)準(zhǔn)差(RSD)表示，相對標(biāo)準(zhǔn)差一般應(yīng)小于15%，在定量下限附近相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)小于20%。

5.準(zhǔn)確度用相對回收率表示，即采用“回收試驗(yàn)”或“加樣回收試驗(yàn)”得到藥物在樣品中的回收率，一般應(yīng)在85%～115%范圍內(nèi)，在最低定量限附近應(yīng)在80%～120%范圍內(nèi)

定量下限

定量下限是標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度點(diǎn)，要求至少能滿足測定3～5個半衰期時樣品中的藥物濃度，或Cmax的1／10～1／20時的藥物濃度，其準(zhǔn)確度應(yīng)在真實(shí)濃度的80%～120%范圍內(nèi)，RSD應(yīng)小于20%，信噪比應(yīng)大于5

樣品穩(wěn)定性

根據(jù)具體情況，對含藥生物樣品在室溫、冰凍或凍融條件下以及不同存放時間進(jìn)行穩(wěn)定性考察，以確定生物樣品的存放條件和時間

提取回收率

分析過程的提取效率，能反映出樣品預(yù)處理過程中組分丟失的情況，是評價萃取方案優(yōu)劣的指標(biāo)之一，以樣品提取和處理過程前后分析物含量百分比表示

質(zhì)控樣品

質(zhì)控樣品系指在生物介質(zhì)中加入已知量待測藥物所配制的樣品，用于質(zhì)量控制

質(zhì)量控制

在生物樣品分析方法確證完成之后開始測試未知樣品，每個未知樣品一般測定一次，必要時可進(jìn)行復(fù)測。每批生物樣品測定時應(yīng)建立新的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并隨行測定高、中、低3個濃度的質(zhì)控樣品，每個濃度多重樣本。每個分析批質(zhì)控樣品數(shù)不得少于未知樣品數(shù)的5%，且不得少于6個。質(zhì)控樣品測定結(jié)果的偏差一般應(yīng)小于15%，最低濃度點(diǎn)偏差應(yīng)小于20%